[发明专利]一种测定沼液中游离氨基酸的方法

摘要

本发明提供了一种测定沼液中游离氨基酸的方法，本发明通过简单高效的分析方法以及确定最佳的反应条件，使实验分析准确、灵敏、快速、重复性和稳定性好，以期为沼液中氨基酸组成的进一步研究以及沼液的开发与利用提供理论依据。

主权项

1.一种测定沼液中游离氨基酸的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)样品处理取沼液，离心，将上清液用0.22μmPTFE滤膜过滤，再调节pH至10.0～10.4，之后旋蒸至干，用超纯水重新溶解，得到脱除氨和挥发性生物有机胺的沼液浓缩液，备用；(2)配制茚三酮溶液、0.06585‑0.32925g/L的异亮氨酸标准溶液、pH＝5.5的醋酸‑醋酸钠缓冲溶液；(3)标准溶液测定并建立标准曲线取异亮氨酸标准溶液5mL于25mL具塞比色管中，加入0.5‑1mL醋酸‑醋酸钠缓冲溶液、0.5‑1mL茚三酮溶液、0.5‑1mL 0.1％抗坏血酸溶液，于100‑120℃下水浴加热15‑20min，取出用流动的自来水迅速冷却至室温，然后用超纯水定容至25mL刻度线，上下颠倒混匀，静置10～15min，于570nm处测定其吸光度，以吸光度为横坐标、异亮氨酸标准溶液的浓度为纵坐标，绘制标准曲线；(4)样品测定取步骤(1)准备好的沼液浓缩液1mL于25mL具塞比色管中，加入0.5‑1mL醋酸‑醋酸钠缓冲溶液、0.5‑1mL茚三酮溶液、0.5‑1mL0.1％抗坏血酸溶液，于100‑120℃下水浴加热15‑20min，取出用流动的自来水迅速冷却至室温，然后用超纯水定容至25mL刻度线，上下颠倒混匀，静置10～15min，在570nm波长下测其吸光度，将所得吸光度值代入步骤(3)所得标准曲线，计算获得沼液样品中氨基酸的含量。