[发明专利]一种温郁金脱菌苗的快繁方法

摘要

本发明提供一种温郁金脱菌苗的快繁技术，包括以下步骤：①外植体的获取；②外植体消菌；③丛生芽的诱导组培苗；④根尖愈伤组织的诱导；⑤温郁金脱菌苗的诱导；⑥温郁金脱菌苗的繁殖。本发明采用组培苗根尖分生组织诱导产生愈伤组织，经再分化获得脱菌苗，有效解决了直接从外植体获取无菌分生组织困难的难题，也保证了无菌苗的获得，解决了通过外植体诱导产生的组培苗由于携带内生菌而无法连续扩繁的问题；该技术发明了脱菌苗在MS+2.0mg/L的6‑BA+0.5mg/L的NAA培养基进行连续扩繁培养，而且实现了扩繁生根同步实现，省去生根壮苗过程，节约了组培成本。

主权项

1.一种温郁金脱菌苗的快繁技术，其特征在于，包括以下步骤：①外植体的获取：将长0.5～1.0cm的芽从块根上切下，置于流水下冲洗，除去表面污物，小心剥离叶鞘，将其切成0.5cm左右的带茎尖小段；②外植体消菌：将带茎尖小段移至超净工作台上用75％酒精消菌5～10秒,无菌水冲洗3～4次，再置于无菌水中，开启臭氧消菌和紫外线灭菌灯一个小时后，滤干置于无菌瓶中；③丛生芽的诱导组培苗：将获得的外植体温郁金小芽,接种到MS培养基，MS培养基中添加1.0‑4.0mg/L的6‑BA、0.1‑0.5mg/L的NAA，培养时间为30天；④根尖愈伤组织的诱导：将获得的温郁金组培苗在MS+2.0mg/L的6‑BA+0.5mg/L的NAA培养基上继续培养30天，获得有粗根系的温郁金完整苗，温郁金完整苗有粗细两种根，选择粗大根系顶端的分生组织，用解剖刀切下，接种于MS+0.5mg/L的6‑BA+5mg/L的2,4‑D的培养基上，培养时间为30天，获得愈伤组织；⑤温郁金脱菌苗的诱导：将获得的温郁金愈伤组织接种于MS+3.0mg/L的6‑BA+0.1mg/L的2,4‑D的培养基上，两星期后陆续有温郁金小苗长出，即得温郁金脱菌苗；⑥温郁金脱菌苗的繁殖：脱菌苗在MS+2.0mg/L的6‑BA+0.5mg/L的NAA培养基上进行扩繁培养。