[发明专利]一种娑罗子的组织培养快繁方法

摘要

本发明公开了一种娑罗子的组织培养快繁方法，通过组织培养技术获得株系稳定的种苗的育苗方法。本发明以娑罗子带节藤茎为外植体，通过诱导不定芽、丛生芽增殖培养、试管苗生根以及炼苗移栽等阶段实现了娑罗子种苗的组织培养快速繁殖。解决了娑罗子大规模种植的种苗供应，也为以娑罗子药材为原料的药品生产提供了原料保证。

主权项

1.一种娑罗子的组织培养快繁方法，其特征在于包括以下工艺步骤：步骤（1），诱导不定芽：选取娑罗子带节藤茎为外植体,经75%～80%酒精消毒25秒种后，用无菌水冲洗10次后置于0.1%～0.3%的升汞溶液中消毒36分钟，然后用无菌水冲洗11次，经无菌滤纸吸干水分后接种到诱导培养基上,在25～28℃条件下全暗培养，直至诱导形成不定芽；诱导培养基为：以GS为基本培养基，附加4.5%蔗糖、0.8%琼脂、0.5%活性炭、0.9%酸性水解酪蛋白以及2.9mg/L KT、2.9mg/L IBA和1.9mg/L 2,4‑D，pH值为5.9;步骤（2），丛生芽增殖培养：将不定芽接种到增殖培养基上进行增殖培养，接种后置于每天光照21小时，光照强度为2000lx，培养温度为25～28℃的条件下培养，36天转接一次；增殖培养基为：以MS为基本培养基，附加3.5mg/L 6‑BA、2.5mg/L NAA 、7.5mg/L核黄素、1.5mg/L D‑泛酸钙、7.5mg/L抗坏血酸、6.5mg/L L‑半胱氨酸和4.5%蔗糖、1.5%琼脂、0.6%活性炭，pH值为5.9;步骤（3），试管苗生根：将长至2～4cm的丛生芽分切接种到生根培养基上进行诱导生根，接种后先在25～28℃条件下全暗培养19天，然后置于每天光照15小时，光照强度为3600lx，培养温度为25～28℃的条件下培养至生根；生根培养基为：以1/2MS为基本培养基，附加1.2mg/L IBA、1.1mg/L GGR、3.5mg/L L‑半胱氨酸和3.5%蔗糖、0.8%琼脂、0.6%活性炭，pH值为5.9;步骤（4），炼苗移栽：将长至10cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗10天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由泥炭土和河沙（2：1）混合成的基质中并定植于大田中。