[发明专利]一种川牛膝的组织培养技术

摘要

本发明公开了一种川牛膝的组织培养技术，涉及川牛膝通过离体快繁技术获得优质种苗的育苗方法。本发明以川牛膝带芽茎段为外植体，经过外植体消毒、丛生芽诱导、生根培养、炼苗移栽等过程从而建立了川牛膝组织培养快速繁殖体系，加速川牛膝良种的推广和资源开发利用具有重要的现实意义。

主权项

1.一种川牛膝的组织培养技术，其特征在于包括以下步骤：步骤（1），丛生芽诱导：选取生长健壮无病虫的幼树当年生的带芽茎段作为外植体,用洗洁精水溶液浸泡20min，然后用自来水冲洗38min，擦干表面水分后备用,在超净工作台中以70%～80%乙醇浸泡20s，0.1%升汞溶液消毒28min，再用无菌水清洗10次，擦干后切成长度为2.0cm的茎段接种到诱导培养基上,先在24℃条件下全暗培养28天，然后置于每天光照19小时，光照强度为2000lx，培养温度为24℃条件下培养，直至诱导形成丛生芽；诱导培养基为：MS+8mg/L6‑BA+4mg/L NAA+0.8mmol/L La(NO3)2+3.8%蔗糖+0.6%琼脂+1.8%活性炭，pH值为5.3；步骤（2），增殖培养：将步骤（1）所得的丛生芽转入增殖培养基上进行增殖培养，接种后先在24℃条件下全暗培养直至叶腋处萌生一个侧芽，然后置于每天光照20小时，光照强度为2000lx，培养温度为24℃的条件下培养直至各丛生芽伸长到8cm；增殖培养基为：MS+9mg/L6‑BA+0.9mg/L NAA+3.9%蔗糖+0.8%琼脂+1.1%活性炭，pH值为5.3；步骤（3），生根培养：将步骤（1）或步骤（2）所获得的高度约为8cm的丛生芽芽切割并接种到生根培养基上进行生根培养，接种后先在24℃条件下全暗培养10天，然后置于每天光照15小时，光照强度为3000lx，培养温度为24℃的条件下培养至生根；生根培养基为：1/2MS+8mg/L NAA+5%蔗糖+0.9%琼脂+0.3%活性炭，pH值为5.3；步骤（4），炼苗移栽：川牛膝瓶内生根35天后，置于自然光照下炼苗10天后，洗净根部培养基，移栽由黄心土：河沙＝2：1混合成的基质中。