[发明专利]一种人工嵌合启动子及其构建方法有效
| 申请号: | 201811301970.X | 申请日: | 2018-11-02 |
| 公开(公告)号: | CN109486815B | 公开(公告)日: | 2021-12-31 |
| 发明(设计)人: | 杨星勇;方小艳;谢成建 | 申请(专利权)人: | 成都大学 |
| 主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/82 |
| 代理公司: | 重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙) 50230 | 代理人: | 包晓静 |
| 地址: | 610106 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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| 摘要: | 本发明属于基因工程技术领域,公开了一种人工嵌合启动子及其构建方法;通过融合PCR的方法将pTobR与pWIN组合并在其中插入一个人工组合元件C1构建成嵌合启动子TC1W;将嵌合启动子TC1W构建入pBI121双元植物表达载体,通过农杆菌介导将TC1W转入烟草;对转基因烟草植株进行GUS组织染色以及GUS蛋白酶活测定探究融合启动子TC1W驱动下游GUS基因的表达模式。本发明通过组合不同的启动子元件,替换或是重新设计构建出新的人工启动子,构建出具有诱导因子广、本底活性低、表达强度高、表达启动快等特点的新启动子,能够更好地控制下游目的基因的表达。在无诱导因子作用下,TC1W启动子只表现有根特异性。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 人工 嵌合 启动子 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
1.一种人工嵌合启动子的构建方法,其特征在于,所述人工嵌合启动子的构建方法包括以下步骤:步骤一,通过融合PCR的方法将pTobR与pWIN组合并在其中插入一个人工组合元件C1构建成嵌合启动子TC1W;步骤二,将嵌合启动子TC1W构建入pBI121双元植物表达载体,通过农杆菌介导将TC1W转入烟草;对转基因烟草植株进行GUS组织染色以及GUS蛋白酶活测定探究融合启动子TC1W驱动下游GUS基因的表达模式。
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