[发明专利]一种通过硫酸二乙酯及紫外线诱变灰黄霉素菌种的方法

摘要

本发明公开了一种通过硫酸二乙酯及紫外线诱变灰黄霉素菌种的方法，首先把选取好的菌落用玻璃珠打碎，制成孢子悬液，从中吸取单孢子悬液1ml稀释作对照，另取滤液加入双碟中，其中双碟有事先配制好的含有硫酸二乙酯的培养基；用紫外线均匀照射30min，用黑布罩住，用无菌水稀释后，均匀涂布于平皿，形成单菌落，移入恒温箱中培养，8天后菌落长好，挑取分生孢子单菌落接入斜面培养8天；成熟后的菌落接入摇瓶进行初筛，选取效价单位高于出发菌种3％的10个斜面，转接斜面，培养成熟后，再进行摇瓶复筛；选取复筛后单位较高的5个斜面，将对应编号的斜面埋沙土，进行保藏。本发明能够进一步提高发酵单位，使菌种保持优良特性。

主权项

1.一种通过硫酸二乙酯及紫外线诱变灰黄霉素菌种的方法，其特征在于：所述诱变灰黄霉素菌种的方法具体包括如下步骤：a、首先把选取好的灰黄霉素菌落用玻璃珠打碎，制成孢子悬液，从孢子悬液中吸取单孢子悬液1ml，稀释作对照，另取孢子滤液加入双碟中，其中双碟中放置有事先配制好的含有硫酸二乙酯的培养基；b、然后用紫外线对双碟中的孢子滤液均匀照射20～30min，照射完紫外线后用黑布罩住双碟；c、紫外照射后细胞产生复活作用，以极快的速度将双碟中的孢子滤液用无菌水稀释，用无菌水稀释后的孢子滤液均匀涂布于平皿，耙匀，形成单菌落，移入温度设定为28℃±1℃的恒温箱中培养；d、恒温箱中培养8天后菌落长好，菌落外观美观、大小均匀、孢子雪白、厚实丰满，形成单菌落；e、再挑取分生孢子单菌落接入斜面培养8天，培养后的成熟菌落大小均匀、厚实、孢子丰满，进行编号；f、将步骤e中的成熟菌落接入摇瓶进行初筛，选取效价单位高于出发菌种3％的10～15个斜面，转接斜面，并编号；g、用已选取编号的斜面，通过挖块进行摇瓶复筛，选取复筛后效价高的5～6个对应斜面孢子，埋沙土保藏备用。