[发明专利]一种基因组核苷酸定点替换的方法在审
| 申请号： | 201811123556.4 | 申请日： | 2018-09-26 |
| 公开（公告）号： | CN109266686A | 公开（公告）日： | 2019-01-25 |
| 发明（设计）人： | 杨进孝;杨永星;宋伟;宋金岭;李宏潮 | 申请（专利权）人： | 北京市农林科学院 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;C12N15/82;C12N9/22;C12N9/78;C07K19/00;C12N15/62 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;秦梦楠 |
| 地址： | 100097 北京市海淀区曙*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基因组核苷酸定点替换的方法。本发明保护一种碱基编辑系统，包括融合蛋白和sgRNA；所述融合蛋白由切刻酶、胞嘧啶核苷脱氨酶PmCDA1和尿嘧啶DNA糖化酶抑制剂UGI组成；所述切刻酶如序列表的序列15自N端第1‑1423位氨基酸所示；所述sgRNA的核苷酸序列如序列表的序列3自5’端第441‑526位所示。本发明首次将高保真酶eSpCas9(1.1)n和优化的sgRNA运用到PmCDA1介导的碱基编辑系统中，大部分靶点提高了C·T碱基替换的替换效率并大幅度降低了脱靶效应。 | ||
| 搜索关键词： | 替换 基因组核苷酸 编辑系统 融合蛋白 碱基 胞嘧啶核苷脱氨酶 核苷酸序列 高保真酶 尿嘧啶 糖化酶 抑制剂 氨基酸 靶点 介导 优化 | ||
【主权项】：
1.一种碱基编辑系统，包括融合蛋白和sgRNA；所述融合蛋白由切刻酶、胞嘧啶核苷脱氨酶PmCDA1和尿嘧啶DNA糖化酶抑制剂UGI组成；所述切刻酶如序列表的序列15自N端第1‑1423位氨基酸所示；所述sgRNA的核苷酸序列如序列表的序列3自5’端第441‑526位所示。
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