[发明专利]一种高通量测定抗衰老的方法

摘要

一种高通量测定抗衰老的方法属于免疫学领域，该方法包括以下步骤：以酵母作为衰老模型，结合使用振荡器，培养箱和酶标仪等仪器，在660nm处检测吸光度，来测量液体培养基中老化细胞的生长，从而量化存活率。根据酵母时间老化模型开发了高通量筛选技术，这一种新型的高通量筛选抗衰老的方法，可以自动高效的提供可量化数据，具有高灵敏度、运行时间短、可量化数据和数据分析简单的特点。

主权项

1.一种高通量测定抗衰老的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)制备老化培养物，将冷冻的酵母菌株原种取出，转移到YPD培养基上；(2)将培养基在一定的温度条件下温育2天，直到菌落出现，随后挑取单个菌落，接种到5mL小瓶中，瓶内含有一定体积的YPD液体培养基，并放入恒温振荡培养箱中，在适宜的条件下培养2天；(3)用高压灭菌水将温育2天的培养物进行稀释处理，并在4℃冰箱中储存至少24h；(4)4℃温育24h之后，将一定体积的稀释培养物转移到1.0mL SD培养基中，在适宜的条件下连续搅拌2周或更长的时间；(5)在SD培养基中培养2天后，细胞达到稳定期，并且迎来第一次年龄点，每2‑4天增长一次年龄点；(6)到达每个年龄点时，在96孔微孔板中加入一定体积的混合培养物。并加入一定体积的YPD培养液，用酶标仪在660nm处，每5min或10min检测一次细胞群的吸光值(OD值)，持续时间为12‑24h。