[发明专利]经体外培养的人源性肿瘤异种移植模型的建立方法

摘要

本发明涉及一种人源性异种移植模型研究领域，尤指经体外培养的人源性肿瘤异种移植模型的建立方法，建立方法包括以下步骤：1）收集肿瘤组织标本；2）将肿瘤组织置于培养液中；3）完成低温运输及处理准备；4）在无菌操作台内将肿瘤组织切成米粒大小；5）肿瘤组织清洗，然后置于48孔板中培养；6）通过原位末端标记法检测组织凋亡情况；7）选取免疫缺陷型NCG小鼠经麻醉与皮肤处理；8）将培养的肿瘤组织植入小鼠肾包膜内；9）经过3个月后完成建模；本发明为异种移植模型选择肿瘤组织块进行建模，有利于保留原发肿瘤的组织病理及遗传学特性；且获取的肿瘤组织先进行体外培养，有利于肿瘤分型和临床实践；添加PD98059和人工基质胶可以大幅度减少组织凋亡，有利于提高移植成功率。

主权项

1.经体外培养的人源性肿瘤异种移植模型的建立方法，其特征在于，所述的建立方法包括以下步骤：1）收集经手术切除的肿瘤组织标本；2）将所述肿瘤组织暂时置于预冷的含抗生素的培养液中储存；3）然后于2h内完成低温运输并准备进一步处理；4）在无菌操作台内，将从步骤2）的培养液中取得的肿瘤组织切成米粒大小；5）所述肿瘤组织经含抗生素的PBS清洗，然后置于48孔板中培养；随后在48孔板中加入培养基，再添加调节激酶抑制剂PD98059；6）所述肿瘤组织通过原位末端标记法，检测组织凋亡情况；7）选取免疫缺陷型NCG(NOD‑Prkdcem26Cd52Il2rgem26Cd22/Nju)小鼠经腹腔麻醉、消毒背部皮肤处理，然后自肋脊角逐层切开暴露肾脏，揭开肾包膜；8）将培养的肿瘤组织用毛细玻璃管轻轻植入小鼠肾包膜内，缝合肌肉及皮肤；9）经过3个月后完成建模，得到所述人源性肿瘤异种移植模型。