[发明专利]一种婴幼儿乳粉中低聚果糖和棉子糖的检测方法

摘要

本发明公开了一种婴幼儿乳粉中低聚果糖和棉子糖的检测方法，包括以下步骤：（1）前处理；（2）标准溶液的配置；（3）获得液相色谱图、回归方程；（4）定性分析；（5）定量计算，采用外标法定量：根据试样色谱图中色谱峰的面积，采用步骤（3）的回归方程，计算得到蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖或/和棉子糖的浓度；本研究优选新型的亲水分离材料，结合高效液相色谱技术，发展了一种简便、快速、准确检测婴幼儿配方乳粉中低聚果糖和棉子糖同时检测的定性定量方法。

主权项

1.一种婴幼儿乳粉中低聚果糖和棉子糖的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）前处理：称取1 g试样，置于15 mL离心管中，加5 mL温水，涡旋溶解后80 ℃水浴振荡提取30 min，取1 mL提取液于另一离心管中，加3 mL乙腈+水，乙腈与水体积比2：1，加0.2 g C18吸附剂，涡旋，离心，上清液过0.22 μm有机滤膜，待上机；（2）标准溶液的配置：分别准确称取蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖和棉子糖各标准物质100 mg于10 mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，配制成10 mg/mL标准储备液，于4 ℃条件下保存；以1:1乙腈‑水将标准储备液配制梯度标准工作溶液，于4 ℃条件下保存；（3）获得液相色谱图、回归方程梯度标准工作溶液用高效液相色谱‑蒸发光散射检测仪进行检测，获得色谱图，以色谱峰面积的log值为纵坐标，以标准工作溶液中蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖、棉子糖的相应浓度值的log值为横坐标作图，得log‑log线性回归方程；（4）定性分析试样用高效液相色谱‑蒸发光散射检测仪进行检测，获得试样色谱图；若试样色谱图中存在与标准色谱图中的色谱峰相应的色谱峰；则表明试样中含有蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖、棉子糖；（5）定量计算采用外标法定量：根据试样色谱图中色谱峰的面积，采用步骤（3）的回归方程，计算得到蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖或/和棉子糖的浓度；样品中蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖、棉子糖的含量按下式计算：式（1）中：Xi — 试样中各待测物的含量，单位为毫克每一百克（mg/100g）；c — 测定样品溶液中各待测物的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）；V — 定容体积体积，单位为毫升（mL）；f—稀释倍数；m — 试样的质量，单位为克（g）；Xi分别为X蔗果三糖、X蔗果四糖、X蔗果五糖和X棉子糖；样品中低聚果糖的含量：X低聚果糖分别为X蔗果三糖+X蔗果四糖+X蔗果五糖。