[发明专利]一种具有同时降低甘油三酯和胆固醇作用的干细胞及其制备方法和用途在审
| 申请号： | 201810955908.6 | 申请日： | 2018-08-21 |
| 公开（公告）号： | CN109182379A | 公开（公告）日： | 2019-01-11 |
| 发明（设计）人： | 李程;周海波;丁秋蓉 | 申请（专利权）人： | 杭州观梓健康科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/864 | 分类号： | C12N15/864;C12N5/10;A61K35/28;A61P9/00;A61P3/06 |
| 代理公司： | 北京英创嘉友知识产权代理事务所(普通合伙) 11447 | 代理人： | 耿超;王浩然 |
| 地址： | 310000 浙江省杭州市余杭*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本公开提供了一种具有同时降低甘油三酯和胆固醇作用的干细胞的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：S1、将敲除载体包装到AAV病毒中，形成待转染AAV病毒颗粒；所述敲除载体的序列如SEQ ID NO.3所示；S2、将干细胞的悬液与所述待转染的AAV病毒颗粒的悬液以进行转染，得到转染后的培养物；S3、将所述转染后的培养物极限稀释后进行单克隆化培养，并筛选出敲除了PCSK9基因和APOC3基因的单克隆细胞株。本公开还提供了如上所述的制备方法制备得到的干细胞及其在制备用于治疗心血管疾病的药物中的用途。通过上述技术方案，本公开提供了一种新的防治心血管疾病的方案，有效地降低了心血管疾病的发病率。 | ||
| 搜索关键词： | 转染 制备 干细胞 降低甘油三酯 胆固醇作用 培养物 敲除 悬液 防治心血管疾病 治疗心血管疾病 单克隆细胞株 心血管疾病 单克隆化 载体包装 有效地 基因 稀释 发病率 筛选 | ||
【主权项】：
1.一种具有同时降低甘油三酯和胆固醇作用的干细胞的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：S1、将敲除载体包装到AAV病毒中，形成待转染AAV病毒颗粒；所述敲除载体的序列如SEQ ID NO.3所示；S2、将干细胞的悬液与所述待转染的AAV病毒颗粒的悬液以进行4‑30小时的转染，得到转染后的培养物；S3、将所述转染后的培养物极限稀释后进行单克隆化培养，并通过PCR及测序筛选出敲除了PCSK9基因和APOC3基因的单克隆细胞株。
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