[发明专利]一种基于解旋酶和切刻酶的等温扩增核酸检测方法及试剂盒在审
申请号: | 201810922821.9 | 申请日: | 2018-08-14 |
公开(公告)号: | CN109097448A | 公开(公告)日: | 2018-12-28 |
发明(设计)人: | 陈瑞;陈杰 | 申请(专利权)人: | 深圳市赛哲生物有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6844 | 分类号: | C12Q1/6844 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 单香杰 |
地址: | 518067 广东省深圳市南山区招*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于解旋酶和切刻酶的等温扩增核酸检测方法,包括如下步骤:S1.根据目标核酸序列设计特异性扩增引物和带有切刻酶识别位点的Taqman探针;S2.将样本核酸经酶处理得到单链目标核酸模板;S3.将S1所得Taqman探针与S2所得单链目标核酸模板特异性结合,得到特异性结合产物,使用切刻酶酶切特异性结合产物,并实时检测荧光信号。本发明将解旋酶与切刻酶联合使用,设计带有切刻酶切割位点的Taqman探针,无需扩增出大量核酸产物,只需要产生适量单链模板,然后用切刻酶不断切割与靶位点结合的探针即可进行检测,可以避免等温扩增容易造成实验室污染的缺点,操作简便、快速,适用于现场快速检测。 | ||
搜索关键词: | 特异性结合 等温扩增 解旋酶 核酸检测 目标核酸 单链 位点 特异性扩增引物 目标核酸序列 现场快速检测 单链模板 核酸产物 实时检测 样本核酸 荧光信号 靶位点 酶处理 酶联合 酶切割 酶识别 试剂盒 扩增 酶酶 探针 切割 检测 污染 | ||
【主权项】:
1.一种基于解旋酶和切刻酶的等温扩增核酸检测方法,其特征在于,包括如下步骤:S1.根据目标核酸序列设计特异性扩增引物和带有切刻酶识别位点的Taqman探针;S2.将样本核酸经酶处理得到单链目标核酸模板;S3.将S1所得Taqman探针与S2所得单链目标核酸模板特异性结合,得到特异性结合产物,使用切刻酶酶切特异性结合产物,并实时检测荧光信号。
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