[发明专利]一种β-葡萄糖苷酶对苷类药物水解条件的优化方法

摘要

本发明公开一种β‑葡萄糖苷酶对苷类药物水解条件的优化方法，本发明利用β‑葡萄糖苷酶能够水解非还原性β‑糖苷键并释放出相应配基和葡萄糖，对京尼平苷，牛蒡子苷及虎杖苷等苷类物质进行水解，京尼平苷，牛蒡子苷及虎杖苷等苷类底物的浓度，反应温度，pH，反应时间对β‑葡萄糖苷酶酶解作用，使用β‑葡萄糖苷酶对京尼平苷、牛蒡子苷、虎杖苷这三种糖苷进行转化通过测定苷类物质水解时最适温度、pH、底物浓度、反应时间来确定水解反应的最适反应组合，提高苷类物质转化率。

主权项

1.一种β‑葡萄糖苷酶对苷类药物水解条件的优化方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）分别称取0.02gβ‑葡萄糖苷酶、0.01g‑0.02g三种底物至1.5mlep管玻璃棒中，加入1ml醋酸钠缓冲液（pH值为2.6‑7）进行溶解；（2）取50μl酶与50μl三种底物至ep管玻璃棒中，底物浓度稀释后分别为2%，1%，0.5%，0.1%，0.005%，反应温度分别为40℃，45℃，50℃，反应时间分别为1h，2h，4h，6h，8h，10h；（3）反应完之后加入300μlDNS，并在沸水中煮10min，在A520nm下测吸光值；（4）根据葡萄糖‑吸光值标准曲线，算出反应液中葡糖糖的浓度。