[发明专利]一种含有HA蛋白融合标签的植物表达质粒载体及其载体的构建方法在审

专利信息
申请号: 201810799423.2 申请日: 2018-07-19
公开(公告)号: CN108841862A 公开(公告)日: 2018-11-20
发明(设计)人: 江文波;庞永珍 申请(专利权)人: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
主分类号: C12N15/82 分类号: C12N15/82;C12N15/65;C12N15/66
代理公司: 北京华仲龙腾专利代理事务所(普通合伙) 11548 代理人: 黄玉珏
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
权利要求书: 暂无信息 说明书: 暂无信息
摘要: 发明公开的一种含有HA蛋白融合标签的植物表达质粒载体,为该载体在植物表达质粒载体的C端含有HA蛋白融合标签。构建所述质粒载体方法,包括如下步骤:(1)以pCAMBIA1302为出发质粒,采用Eco065I酶切该质粒,然后用Klenow Fragment酶将Eco065I酶切后的粘性末端补平成平末端,再用SpeI酶切,通过凝胶电泳切胶回收大片段;(2)全序列合成包含编码3个HA蛋白的核苷酸序列;(3)设计扩增引物;(4)在N端加上SpeI酶切位点,在C端加上一个核苷酸G;用SpeI酶切该合成片段;最后连接产物,热激转化DH5α,通过PCR鉴定得到阳性克隆。本发明的优点在于,得到HA蛋白融合标签的植物表达质粒载体,进而帮助使用者快速的研究蛋白功能,并且不会对目标蛋白自身的功能发生干扰,保证能够准确地研究蛋白的功能。
搜索关键词: 植物表达质粒 融合标签 构建 酶切 设计扩增引物 核苷酸序列 全序列合成 成平末端 出发质粒 蛋白功能 功能发生 合成片段 连接产物 目标蛋白 凝胶电泳 阳性克隆 粘性末端 质粒载体 核苷酸 补平 切胶 热激 位点 质粒 蛋白 大片 回收 研究 转化 帮助 保证
【主权项】:
1.一种含有HA蛋白融合标签的植物表达质粒载体,其特征在于,该载体为在植物表达质粒载体的C端含有HA蛋白融合标签。
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