[发明专利]基于多能干细胞技术建立“人源性”心肌肥大模型的方法有效
| 申请号： | 201810778987.8 | 申请日： | 2018-07-16 |
| 公开（公告）号： | CN108913655B | 公开（公告）日： | 2022-07-15 |
| 发明（设计）人： | 梁平;唐玲;王洪坤;宫庭钰 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 郑海峰 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： |
本发明公开了一种基于多能干细胞技术建立“人源性”心肌肥大模型的方法。该方法是将培养至30天左右的由多能干细胞分化而成的心肌细胞重悬后接种至12孔板，每孔1.5×10 |
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| 搜索关键词： | 基于 多能 干细胞 技术 建立 人源性 心肌 肥大 模型 方法 | ||
【主权项】：
1.一种基于多能干细胞技术建立“人源性”心肌肥大模型的方法，其特征在于包括如下步骤：1)多能干细胞定向分化获得心肌细胞；2)吸尽心肌细胞陈旧培养基，杜尔贝科磷酸盐缓冲液(DPBS)清洗，每孔加入1ml的胰蛋白酶‑EDTA消化液，37℃培养箱消化，使用DMEM/F12培养基中和消化液并收集细胞悬液至离心管中，离心后加入心肌细胞培养基(RPMI+B27+Insulin)，以1:8‑1:12的比例接种到基质胶(Matrigel)包被的12孔板，每孔1.5×106个细胞，24小时贴壁；3)进行佛波醇‑12‑肉豆蔻酸酯‑13‑乙酸酯(Phorbol‑12‑myristate‑13‑acetate，PMA)加药实验，每孔加入终浓度为1μM的PMA溶液1.2ml，作用4天，获得心肌肥大模型。
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