[发明专利]高效提取植物基因组DNA的无毒提取液组合GPR.1及提取方法有效
申请号: | 201810774872.1 | 申请日: | 2018-07-16 |
公开(公告)号: | CN108841820B | 公开(公告)日: | 2021-09-14 |
发明(设计)人: | 高建明;桂枝 | 申请(专利权)人: | 天津农学院 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人: | 郭晓迪 |
地址: | 300384*** | 国省代码: | 天津;12 |
权利要求书: | 暂无信息 | 说明书: | 暂无信息 |
摘要: | 本发明涉及一种高效提取植物基因组DNA的无毒提取液组合GPR.1及基于该提取液的提取方法。具体包括:利用含PVPP和蛋白酶K等无毒化合物的SDS抽提缓冲液裂解植物细胞,使染色体离析、蛋白质变性,释放出核酸;然后,在加入乙酸钾去除大部分蛋白质和多糖后,采用PEG8000溶液和乙醇/高盐溶液连续两次沉淀DNA,以去除多糖类、多酚类、RNA、NTP等杂质,最终得到大量高纯度的DNA。采用本方法可从多种植物的叶片(幼叶至成熟叶片)中提取出大量高纯度的基因组DNA,对操作者无毒,环境污染小,成本低,时间短。 | ||
搜索关键词: | 高效 提取 植物 基因组 dna 无毒 组合 gpr 方法 | ||
【主权项】:
1.一种高效提取植物基因组DNA的无毒提取液组合GPR.1,其组成如下:溶液GPR.1A:2~3.5%PEG8000,0.5M NaCl,0.1M Tris‑HCl,0.05M EDTA,2~4%PVPP临用前加入,余量为双蒸水;溶液GPR.1D:18~20%PEG8000,3.3~3.6M NaCl,余量为双蒸水;溶液GNR.1E:50mM Tris‑HCl,10mM EDTA,2.5M NaCl,余量为双蒸水;还包括:20mg/mL蛋白酶K,使用时单独加入;20%SDS,使用时单独加入;5M乙酸钾溶液,使用时单独加入。
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