[发明专利]一种芝麻主要过敏原的质谱定性检测方法

摘要

本发明涉及芝麻7种过敏原蛋白（Ses i 1~Ses i 7）的LC‑MS/MS‑MRM定性检测方法。该方法通过含7M尿素+2M硫脲的+4%CHAPS水溶液提取芝麻中的过敏原蛋白质，经胰蛋白酶4 h酶切，肽段脱盐后用纳升液相色谱高分辨串联质谱（NanoLC‑Q‑TOF）分析，利用Proteinpilot 5.0软件对高分辨质谱获得的数据进行搜库鉴定，选取响应高、无漏切、无可变修饰、长度25个氨基酸的肽段在NCBI上进行Blast比对，并在15种阴性样品进行特异性验证，挖掘得到共计12条芝麻各过敏原蛋白的特征肽段。同时采用SKYLINE软件对芝麻过敏原特征肽段构建MRM离子对，每条肽段6个，提高检测的灵敏度和准确度。能够高通量、简单、快速、准确且灵敏地检测芝麻各过敏原成分，对于保护消费者安全、促进食品进出口贸易、实施食品过敏原标识方法具有重大意义。

主权项

1.一种基于LC‑MS/MS‑MRM的芝麻过敏原蛋白的检测方法，用于检测食品中芝麻过敏原蛋白成分，其特征在于，挖掘的芝麻各过敏原蛋白的特征肽段氨基酸序列如下：Ses i 1特征肽段1：QQQQEGGYQEGQSQQVYQR；Ses i 2特征肽段1：MC[CAM]GMSYPTEC[CAM]R；Ses i 3特征肽段1：IPYVFEDQHFITGF；Ses i 3特征肽段2：SFSDEILEAAFNTR；Ses i 4特征肽段1：GVQEGTLYVGEK；Ses i 4特征肽段2：ATGQGPLEYAK；Ses i 5特征肽段1：APHLQLQPR；Ses i 6特征肽段1：AFYLAGGVPR；Ses i 6特征肽段2：IQSEGGTTELWDER；Ses i 6特征肽段3：ISGAQPSLR；Ses i 7特征肽段1：FESEAGLTEFWDR；Ses i 7特征肽段2：EGQLIIVPQNYVVAK。