[发明专利]一种白芨的种子快速育苗方法

摘要

一种白芨的种子快速育苗方法，属于中药材种植技术领域，包括引种灭菌、原球茎诱导培养、原球茎增殖培养、丛生芽诱导培养、丛生芽增殖培养、生根培养六大步骤，其有益效果是采用种子组培，所得到的幼苗污染率低，分化率高，遗传性状稳定，有效物质含量高；同时本发明方法还大大缩短了白芨的快速育苗周期，从种子到生根苗的组培周期不到4个月，大大缩短了生产时间，降低了生产成本。

主权项

1.一种白芨的种子快速育苗方法，包括引种灭菌、原球茎诱导培养、原球茎增殖培养、丛生芽诱导培养、丛生芽增殖培养、生根培养六大步骤，其特征在于具体方法如下：(1)引种灭菌：选取健壮的野生白芨蒴果，在流水下冲洗，放入1％洗洁精水溶液中浸泡5分钟，然后用刷子轻轻刷洗，并用无菌水充分洗净；在超净工作台上将种子放置在75％的酒精中消毒30秒钟后，再用0.1％的HgCL2水溶液浸泡30min，然后用无菌水冲洗5‑6次，然后置于无菌滤纸上吸干水分后从果实中部剥开，取出种子；(2)原球茎诱导培养：将种子迅速接种到原球茎诱导培养基上，夜温20℃，日温22℃，相对湿度65％‑67％，暗箱条件下进行种子诱导培养，6‑8天后，种子开始萌动膨大；此时调整培养环境，在夜温21℃，日温23℃，相对湿度67％‑69％，光照强度2000LX，每天光照开始时间上午7：00，每天光照时长12小时的条件下进行，再过6‑8天后，形成直径1‑2mm的原球茎；(3)原球茎增殖培养：将原球茎切割后转接到原球茎增殖培养基中，在夜温21℃，日温23℃，相对湿度67％‑69％，光照强度3000LX，每天光照时长14小时的条件下进行原球茎增殖培养，再过9‑12天后，获得大量直径1‑2mm的原球茎；(4)丛生芽诱导培养：将生长状态良好的原球茎转接到丛生芽诱导培养基上，在夜温22℃，日温24℃，相对湿度65％‑67％，光照强度3000LX，每天光照时长12小时条件下进行丛生芽诱导培养，在15‑20天后可观察到原球茎开始分化出芽点，然后将温度调整为夜温23℃，日温25℃，在过8‑10天后，可观察到原球茎长出小芽并开始分叶，再过5‑6天可看到大量径长为1‑2cm的丛生芽；(5)丛生芽增殖培养：当丛生芽径长到1‑2cm时，将其切分成单芽，转入到增殖培养基中，在夜温24℃，日温26℃，相对湿度65％‑67％或者73％‑75％，光照强度3500LX，每天光照开始时间上午7:00，每天光照时长12小时的条件下进行丛生芽增殖培养，13‑17天后可观察到大量新增殖的丛生芽；(6)生根培养：当增殖丛生芽长到3‑4cm时，将其切分成单芽，转入生根培养基上进行生根诱导培养，在夜温24℃，日温26℃，相对湿度65％‑67％或者76％‑78％，光照强度3500LX,每天光照开始时间上午7:00，每天光照时长12小时的条件下进行生根培养，28‑32天后，可观察到大量3‑4cm，每株有根须5‑7根，且根须粗壮的白芨苗；此后，即可将白芨快速苗进行移栽；上述快速繁殖方法中，所提到的各阶段培养基的配方是：原球茎诱导培养：1/2MS+0.9mg/L 6‑BA+0.11mg/L NAA+蔗糖30g/L+琼脂5g/L；pH＝5.8；原球茎增殖培养：1/2MS+1.1mg/L 6‑BA+0.11mg/L NAA+蔗糖30g/L+琼脂5g/L；pH＝5.8；丛生芽诱导培养：BM+BA4+IAA 1+卡拉胶5g/L+蔗糖30/L；pH＝5.8；丛生芽增殖培养：BM+IAA 0.3+卡拉胶5g/L+蔗糖30/L；pH＝5.8；生根培养：BM+IAA1+卡拉胶5g/L+蔗糖30/L；pH＝5.6。