[发明专利]一种基于交联反应的核酸适配体的快速筛选方法及筛选获得的结构开关型核酸适配体有效
申请号: | 201810589689.4 | 申请日: | 2018-06-08 |
公开(公告)号: | CN110577979B | 公开(公告)日: | 2022-09-27 |
发明(设计)人: | 娄新徽;乔娜;吴晓;刁冬林 | 申请(专利权)人: | 首都师范大学 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806;C12N15/115 |
代理公司: | 北京展翅星辰知识产权代理有限公司 11693 | 代理人: | 王文生 |
地址: | 100048 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及一种基于交联反应的核酸适配体的快速筛选新方法及其通过该方法筛选获得的人血清白蛋白的结构开关型核酸适配体。本方法中靶标与核酸适配体文库进行均相孵育,然后通过交联反应将靶标捕获在磁珠上,这样与靶标结合的核酸序列被捕获在磁珠上;将磁性分离出来的与靶标结合的核酸序列通过聚合酶链反应(PCR)进行扩增;将双链PCR产物进行单链制备得到次级文库,次级文库进入下一轮的筛选。将上述过程循环2‑3轮可以实现对文库的快速富集。该方法还可以与其它筛选技术联用,大幅提高筛选效率。按照本方法经3轮富集后的文库仅经过1轮基于文库固定的筛选方法就得到了具有高亲和力和选择性的HSA的SSA。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 交联 反应 核酸 适配体 快速 筛选 方法 获得 结构 开关 | ||
【主权项】:
1.一种基于交联反应的核酸适配体的快速筛选方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:步骤1、文库热处理;步骤2、活化磁珠;步骤3、磁珠负筛选;步骤4、文库与靶标孵育;步骤5、通过交联反应捕获与靶标结合的核酸序列;步骤6、磁珠上结合核酸的洗脱;步骤7、PCR;步骤8、单链DNA制备。/n
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