[发明专利]基于磁性功能化微流控芯片的单核苷酸多态性分析方法

摘要

本发明公开了一种基于磁性功能化微流控芯片的单核苷酸多态性分析方法，属于微流控芯片技术领域。首先将Fe3O4磁性纳米粒子负载于氧化石墨烯表面合成磁性纳米复合材料(GO@Fe3O4)，在外加磁场的作用下将GO@Fe3O4高效可控地固定在微流控芯片分离通道内，获得GO@Fe3O4功能化微流控芯片分离通道。此外，本发明还在GO@Fe3O4功能化微流控芯片分离通道内成功实现了单核苷酸多态性的分析，该分析方法具有简单、方便、高效和耗时短的优点。

主权项

1.基于磁性功能化微流控芯片的单核苷酸多态性分析方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备GO@Fe3O4纳米复合材料，在外加磁铁的作用下将GO@Fe3O4固定于PDMS微流控芯片分离通道内，制成GO@Fe3O4功能化PDMS微流控芯片分离通道；(2)设计一条用亚甲基蓝标记的单链DNA，使得其与microRNA‑21序列完全互补的同时还与microRNA‑21单碱基错配序列sm‑microRNA‑21部分互补，将该单链DNA分别与microRNA‑21及sm‑microRNA‑21杂交形成完全互补的稳定的DNA/microRNA‑21异源双链体和单碱基错配的松散结构的DNA/sm‑microRNA‑21异源双链体，之后，将DNA/microRNA‑21和DNA/sm‑microRNA‑21混合，制得混合样品；(3)以高压电源作为流体驱动装置，在PDMS微流控芯片的分离通道两端施加1000V的分离电压，将通道用运行缓冲溶液冲洗10min；将混合样品加入到PDMS微流控芯片的样品池，驱动样品注入并流经PDMS微流控芯片分离通道，而流经GO@Fe3O4功能化PDMS微流控芯片分离通道后，混合样品内的DNA/microRNA‑21和DNA/sm‑microRNA‑21得到分离，再结合三电极系统，检测标记在DNA上的亚甲基蓝的电化学信号，根据亚甲基蓝的电化学信号的保留时间判断DNA/microRNA‑21和DNA/sm‑microRNA‑21的分离程度，此外，还可根据亚甲基蓝的电化学信号的强度判断microRNA‑21和sm‑microRNA‑21的浓度，实现GO@Fe3O4功能化PDMS微流控芯片对单核苷酸多态性的分离和检测。