[发明专利]在微流控芯片中捕获和鉴定胎儿有核红细胞的方法在审
| 申请号： | 201810578067.1 | 申请日： | 2018-06-07 |
| 公开（公告）号： | CN108753573A | 公开（公告）日： | 2018-11-06 |
| 发明（设计）人： | 赵兴中;魏小云;蔡博 | 申请（专利权）人： | 武汉大学 |
| 主分类号： | C12M1/00 | 分类号： | C12M1/00;C12N5/00;G01N33/569 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 俞琳娟 |
| 地址： | 430072 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提供一种在微流控芯片中捕获和鉴定胎儿有核红细胞的方法，包括：步骤1.采用两步去溶剂法合成明胶纳米颗粒并制备成前驱液，然后通入微流控芯片，在其内壁形成纳米涂层，其中微流控芯片包含多条蛇形主沟道和多个鱼骨单元；步骤2.利用化学修饰方法在纳米涂层上修饰上链酶亲和素，然后嫁接生物素修饰的抗体；步骤3.利用密度梯度离心法，从外周血中分离出含有胎儿有核红细胞的单核细胞层；步骤4.将单核细胞悬液以一定流速通入微流控芯片进行捕获；步骤5.将一定浓度的明胶酶通入到捕获有胎儿有核红细胞的微流控芯片中，通过降解纳米涂层释放胎儿有核红细胞；步骤6.利用特异性抗体对捕获到的胎儿有核红细胞进行鉴定。 | ||
| 搜索关键词： | 胎儿有核红细胞 微流控芯片 捕获 纳米涂层 流控 密度梯度离心法 芯片 单核细胞悬液 单核细胞层 溶剂法合成 生物素修饰 特异性抗体 明胶 化学修饰 纳米颗粒 蛇形 壁形成 明胶酶 前驱液 亲和素 外周血 主沟道 降解 抗体 上链 鱼骨 修饰 制备 嫁接 释放 | ||
【主权项】：
1.一种在微流控芯片中捕获和鉴定胎儿有核红细胞的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1.采用两步去溶剂法合成明胶纳米颗粒并制备成前驱液，将前驱液通入微流控芯片，在该微流控芯片的沟道内壁形成纳米涂层，其中，微流控芯片包含：多条蛇形主沟道，和设置在蛇形主沟道上方、沿着流向排列的多个鱼骨单元，每个鱼骨单元都沿着蛇形主沟道宽度方向延伸、并且呈L形；步骤2.利用化学修饰方法在纳米涂层上修饰上链酶亲和素，然后嫁接生物素修饰的抗体；步骤3.利用密度梯度离心法，从外周血中分离出含有胎儿有核红细胞的单核细胞层；步骤4.将单核细胞悬液以一定流速0.4～1.6mL/h通入微流控芯片进行捕获；步骤5.将一定浓度的明胶酶通入到捕获有胎儿有核红细胞的微流控芯片中，通过降解纳米涂层释放胎儿有核红细胞；以及步骤6.利用特异性抗体对捕获到的胎儿有核红细胞进行鉴定。
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