[发明专利]处理重金属废水用固定化细胞球的制备方法

摘要

本发明公开了一种处理重金属废水用固定化细胞球的制备方法，包括如下步骤，1)将混合发酵培养后收集的类产碱假单胞菌和酿酒酵母混合菌体固定化为外形呈球状，内部呈多孔网状结构的固定化细胞球；2)以淀粉质原料水解液为培养基，在pH=3‑6的条件下接入米根霉孢子悬浮液，振荡培养24‑48h后，过滤收集得到直径为50‑100um米根霉菌丝球；3)将固定化细胞球和米根霉菌丝球填充于生物吸附器内，该生物吸附器由多根吸附柱串接而成；4)重金属废水调整初始重金属离子浓度≤800mg/L，PH=5‑7后，流经生物吸附器，在每根吸附柱内的水力停留时间0.5‑1h。利用不同类的微生物活菌，在不同的吸附机理的作用下，对不同的重金属(Cd2+,Hg2+,Cu2+,Zn2+,Ni2+,Ag2+,Pb2+)均有很好地吸附。

主权项

1.一种固定化细胞球的制备方法，其特征在于，包括如下步骤，/nA)将聚乙烯醇、海藻酸钙、丙烯酰胺与水按质量比6～15：0.5～1.5：3～5：100比例进行混合后，得聚乙烯醇水溶胶，将混合发酵培养后收集的类产碱假单胞菌和酿酒酵母菌体加入至聚乙烯醇水溶胶中形成混合溶液，其中，产碱假单胞菌和酿酒酵母菌体的添加量满足每100mL的聚乙烯醇水溶胶中添加4-6g湿重的产碱假单胞菌和酿酒酵母混合菌；/nB)将混合溶液用蠕动泵加入到含3～5w/v％N’-亚甲基双丙烯酰胺和1-2w/v％CaSO4的饱和硼酸溶液中，形成凝胶球，放置-20℃条件下冷却5-10h,室温下解冻,然后再置于-10℃条件下冷却1-2h,室温下解冻后，将凝胶球投入质量浓度为0.2～0.5g/L磷酸盐中，得到外形呈球状，内部呈多孔网状结构的固定化细胞球；/n类产碱假单胞菌和酿酒酵母的混合发酵培养方法，包括如下步骤：/na）酿酒酵母种子液的培养/n将斜面上酿酒酵母菌种接种于一级种子培养基进行摇瓶培养，在27-30℃，转速260rmp培养24h后，接种于二级种子培养基进行发酵罐培养，在30-32℃，转速260-280rmp，通气量2.5～3m3/h培养24-36h后得酿酒酵母的种子液，其中所述的一级种子培养基为：酵母膏5g/L,蛋白胨6g/L,葡萄糖20g/L;二级种子培养基为：葡萄糖40-50g/L，酵母浸膏5-8g/L，蛋白胨5-8g/L，(NH4)2SO42-3g/L，MgSO4·7H2O0.25-0.3g/L，NaCl0.15-0.2g/L，KH2PO42.8-3g/L；/nb）产碱假单胞菌种子液的培养/n将斜面上产碱假单胞菌菌种接种于一级种子培养基进行摇瓶培养，在27-30℃，转速160-180rmp培养24h后，接种于二级种子培养基进行发酵罐培养，在27-30℃，转速160-180rmp，通气量2.5～3m3/h培养24-36h，得产碱假单胞菌的种子液，其中，所述的一级种子培养基为：葡萄糖20-30g/L，酵母膏5-8g/L，蛋白胨6-8g/L；所述的二级种子培养基为：葡萄糖20-30g/L，豆饼粉10-12g/L，KNO31-1.2g/L，KH2PO41-1.2g/L，FeCl2·6H2O0.05-0.08g/L,CaCl2·7H2O0.02-0.04g/L，MgSO4·7H2O1-1.2g/L；/nc）混合发酵/n将步骤a）所得的酿酒酵母种子液和步骤b）所得的产碱假单胞菌种子液按体积比1-3:1-3进行混合，以10-20%的接种量转入发酵培养基中进行高密度培养，在30℃，转速220-260rmp，通气量5～10m3/h培养36-48h，将发酵好后的培养液静置，离心富集菌体，即为类产碱假单胞菌和酿酒酵母菌体，其中，所述的发酵培养基为：葡糖糖80-100g/L,酵母膏5-10g/L,蛋白胨5-10g/L，豆饼粉10-12g/L，KNO31-1.2g/L，KH2PO42-2.5g/L，FeCl2·6H2O0.05-0.08g/L，CaCl2·7H2O0.02-0.04g/L，MgSO4·7H2O1.5-1.8g/L，NaCl0.15-0.18g/L。/n