[发明专利]一种猪背部脂肪厚度的分子标记方法有效
| 申请号： | 201810570320.9 | 申请日： | 2018-06-05 |
| 公开（公告）号： | CN108753926B | 公开（公告）日： | 2022-03-01 |
| 发明（设计）人： | 李庆岗;苏世广;吴义景;杨家军 | 申请（专利权）人： | 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/683 | 分类号： | C12Q1/683;C12Q1/6888 |
| 代理公司： | 合肥金安专利事务所(普通合伙企业) 34114 | 代理人： | 金惠贞 |
| 地址： | 230031 安徽省合肥市*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种猪背部脂肪厚度的分子标记方法。操作步骤如下：从猪的耳缘组织中提取猪基因组DNA；在猪的钙结合蛋白2（CALB2）基因起始转录位点的‑1201bp至‑654bp间设计1对引物，即上游引物和下游引物；通过聚合酶链式反应得到猪CALB2基因转录起始位点上游‑1201bp至‑654bp间的548bp长的体外扩增产物；对体外扩增产物进行限制性内切酶MspA1I酶切反应；对酶切产物进行多态性（RLFP）检测，获得条带AA型为背部脂肪进度优良基因型，即突变型，故选择条带AA型的仔猪留种，条带AA型猪达100公斤体重时的背部脂肪厚度比GG型个体薄0.95～1.27mm。 | ||
| 搜索关键词： | 种猪 背部 脂肪 厚度 分子 标记 方法 | ||
【主权项】：
1.一种猪背部脂肪厚度的分子标记方法，其特征在于操作步骤如下：（1）提取猪的基因组DNA在仔猪出生当天，采取猪的耳缘组织；从猪的耳缘组织中提取猪基因DNA；所述猪基因组DNA为包含猪的钙结合蛋白2（CALB2）基因起始转录位点的‑1201bp至‑654bp间的核甘酸序列全长为548bp；（2）引物设计在猪的钙结合蛋白2（CALB2）基因起始转录位点的‑1201bp至‑654bp间设计1对引物，即上游引物和下游引物，上游引物和下游引物的序列如下：CALB2‑F上游引物：5’‑TGGTGTTCCTCTCTCCCCTG‑3’CALB2‑R下游引物：5’‑CCACTGTCCTCTCGTGTTGA‑3’；（3）聚合酶链式反应A、配制聚合酶链式反应体系聚合酶链式反应体系包括上游引物、下游引物、脱氧核苷三磷酸、聚合酶、猪基因组DNA；B、聚合酶链式反应进行聚合酶链式反应，得到猪CALB2基因转录起始位点上游‑1201bp至‑654bp间的548bp长的体外扩增产物；（4）酶切反应对体外扩增产物进行限制性内切酶酶切反应，得到酶切产物；（5）多态性（RLFP）检测对酶切产物进行多态性（RLFP）检测，获得AA型个体为不能切开，包括548bp一个片段；背部脂肪厚度优良基因型为突变型，即AA型，选择条带为AA型的个体留种，条带AA型猪达100公斤体重时的背部脂肪厚度比GG型个体薄0.95～1.27mm。
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