[发明专利]一种难溶性脂肽的纯化制备方法在审
| 申请号： | 201810561853.0 | 申请日： | 2018-06-04 |
| 公开（公告）号： | CN108707182A | 公开（公告）日： | 2018-10-26 |
| 发明（设计）人： | 秦敬国;任丽萍;徐海红;徐红岩 | 申请（专利权）人： | 江苏吉泰肽业科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K1/36 | 分类号： | C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20 |
| 代理公司： | 上海浦东良风专利代理有限责任公司 31113 | 代理人： | 张劲风 |
| 地址： | 江苏省盐城市滨海县滨*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种难溶性脂肽的纯化方法，主要解决目前的纯化方法中粗产品难溶，收率低的问题。本发明技术方案是：先用氨水溶液加热溶解样品，提高脂肽的溶解性。然后以高效液相色谱法纯化，采用聚合物色谱柱以碱性溶剂为流动相，有效提高了产品的收率。以C4色谱柱做二次纯化并同时转盐，减少了一步纯化过程。并有效降低有机溶剂的使用量，缩短时间，达到成本低，收率高的目的，同时适用于工业化放大生产。 | ||
| 搜索关键词： | 收率 脂肽 难溶性 高效液相色谱法 聚合物色谱 氨水溶液 二次纯化 放大生产 加热溶解 碱性溶剂 一步纯化 有机溶剂 粗产品 流动相 难溶 转盐 制备 | ||
【主权项】：
1.一种难溶性脂肽的纯化方法，其特征在于：包括下述步骤：（1）将脂肽粗品溶于氨水中，放于水浴锅中加热搅拌直至溶液呈澄清状态，冷却，用滤膜过滤，收集滤液；（2）用反相高效液相色谱法进行纯化，填料为反相聚合物色谱柱，流动相A为质量百分比为0.05%~0.1%的碳酸氢铵水溶液，流动相B为纯乙腈溶液，梯度洗脱，流动相梯度为A:B由（60~40）:（40~60）到（40~20）:（60~80），收集主峰；（3）用反相高效液相色谱法进行二次纯化同时转盐，填料为C4反相硅胶柱，流动相C为体积百分比为1~5%的冰醋酸水溶液，流动相D为体积百分比为1~5%的冰醋酸乙腈溶液，梯度洗脱，流动相梯度为C:D由（50~40）:（50~60）到（30~20）:（70~80），收集检测合格后的主峰，减压蒸馏，冷冻干燥，得到纯度大于98%以上的脂肽。
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