[发明专利]一种HIV usRNA和细胞数双重定量的实时荧光PCR试剂盒及其检测方法

摘要

本发明公开了一种同时定量外周血淋巴细胞中HIV usRNA和细胞数量的双重实时荧光PCR试剂盒及其检测方法，本发明的一种外周血淋巴细胞中HIV usRNA/细胞数量的双重实时荧光定量试剂盒，包括限制性内切酶、限制性内切酶buffer、RT‑PCR mix、酶混合液、HIV usRNA引物组、HIV usRNA探针、β‑actin引物组、β‑actin探针和质控品。本发明能够实现同时对外周血淋巴细胞中的HIV usRNA和细胞数量进行快速检测，在临床上具备更大的价值。

主权项

1.一种外周血淋巴细胞中HIV usRNA和细胞数量双重定量的实时荧光PCR试剂盒，其特征在于：包括限制性内切酶、限制性内切酶buffer、RT‑PCR mix、酶混合液、引物组、探针组和质控品；所述的酶混合液包括限制性内切酶，Taq酶和mmlv酶；所述的RT‑PCR mix，包含Tris‑MOPS‑柠檬酸钠缓冲体系、硫酸铵和氯化钾；所述的引物组由HIV usRNA引物组和β‑ctin引物组组成；所述的探针组由HIV usRNA探针和β‑actin探针组成；所述的HIV usRNA引物组由HIV usRNA‑F1上游引物、HIV usRNA‑F2上游引物、HIV usRNA‑R1下游引物和HIV usRNA‑R2下游引物组成；所述的β‑actin引物组由β‑actin‑F上游引物和β‑actin‑R下游引物组成；所述的HIV usRNA‑F1上游引物具有SEQ ID No.1的核苷酸序列；所述的HIV usRNA‑F2上游引物具有SEQ ID No.3的核苷酸序列；所述的HIV usRNA‑R1下游引物具有SEQ ID No.2的核苷酸序列；所述的HIV usRNA‑R2下游引物具有SEQ ID No.4的核苷酸序列；所述的β‑actin‑F上游引物具有SEQ ID No.6的核苷酸序列；所述的β‑actin‑R下游引物具有SEQ ID No.7的核苷酸序列；所述的HIV usRNA探针具有SEQ ID No.5的核苷酸序列；所述的β‑actin探针具有SEQ ID No.8的核苷酸序列。