[发明专利]一种同时检测四环素类药物、氟喹诺酮类药物和磺胺类药物的试纸条及方法

摘要

本发明公开了一种同时检测四环素类药物、氟喹诺酮类药物和磺胺类药物的试纸条及方法。该试纸条包括试纸和微孔试剂，所述试纸由样品吸收垫、反应膜、吸水垫、保护膜、底板依次连接组成，所述反应膜上有三条检测线和一条质控线，所述三条检测线上分别包被有四环素类药物半抗原‑载体蛋白偶联物、氟喹诺酮类药物半抗原‑载体蛋白偶联物、磺胺类药物半抗原‑载体蛋白偶联物，所述质控线上包被有羊抗鼠抗抗体；所述微孔试剂中冻干有四环素类药物单克隆抗体‑胶体金标记物、氟喹诺酮类药物单克隆抗体‑胶体金标记物和磺胺类药物单克隆抗体‑胶体金标记物。用本发明试纸条同时检测四环素类药物、氟喹诺酮类药物和磺胺类药物的方法简便、快速、直观、准确、便于携带、适用范围广、成本低、易推广使用。

主权项

1.一种同时检测四环素类药物、氟喹诺酮类药物和磺胺类药物的试纸条，包括试纸和微孔试剂，所述试纸包括样品吸收垫、反应膜、吸水垫、保护膜、底板，其特征在于：所述反应膜上有三条检测线和一条质控线，所述三条检测线上分别包被有四环素类药物半抗原‑载体蛋白偶联物、氟喹诺酮类药物半抗原‑载体蛋白偶联物、磺胺类药物半抗原‑载体蛋白偶联物，所述质控线上包被有羊抗鼠抗抗体；所述微孔试剂中冻干有四环素类药物单克隆抗体‑胶体金标记物、氟喹诺酮类药物单克隆抗体‑胶体金标记物和磺胺类药物单克隆抗体‑胶体金标记物；其中，所述四环素类药物单克隆抗体是以四环素类药物半抗原‑载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得；所述氟喹诺酮类药物单克隆抗体是以氟喹诺酮类药物半抗原‑载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得；所述磺胺类药物单克隆抗体是以磺胺类药物半抗原‑载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得；所述四环素类药物半抗原的合成方法为：N‑(4‑氨苯基)马来酰亚胺0.25g，加水2mL，加1mol/L盐酸3.98mL，搅拌，溶解澄清，0～5℃搅拌30min，加亚硝酸钠0.11g，继续搅拌2h，得到重氮盐溶液A液；取四环素0.5g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液10mL溶解，得到B液，将A液滴加到B液中，0～5℃搅拌4h；停止反应，用6mol/L盐酸调节pH到7，加乙酸乙酯100mL×3，萃取三次，合并有机相，浓缩蒸干，无水乙醇重结晶，得到四环素类药物半抗原；所述氟喹诺酮类药物半抗原的合成方法为：取非那沙星0.5g，加甲醇30mL溶解；取2‑吗啉甲酸0.63g，加5mL水溶解，加入到非那沙星溶液中，搅拌，加冰乙酸0.1mL，充分搅拌后，加37％甲醛0.76mL，充分搅拌，加热回流反应4h，停止反应，旋蒸，除去甲醇，加水，加乙酸乙酯80mL×3，萃取三次，合并有机相，体积比为1:1的二氯甲烷/正己烷80mL重结晶，得到氟喹诺酮类药物半抗原；所述磺胺类药物半抗原的合成方法为：取磺胺甲噁唑BATA‑D‑葡糖苷酸0.5g，加N,N‑二甲基甲酰胺溶解，加三乙胺0.2mL，氯甲酸异丁酯0.45mL，搅拌4h，加0.18g氨基己酸，继续搅拌3h，停止反应，加水50mL，加乙酸乙酯80mL×3，萃取三次，合并有机相，蒸干，上硅胶柱，体积比为10:1的二氯甲烷/甲醇洗脱纯化，得到磺胺类药物半抗原。