[发明专利]近生理状态生物大分子晶体的衍射方法

摘要

本发明公开了一种近生理状态生物大分子晶体的衍射方法，用于解决现有生物大分子晶体的衍射方法实时性差的技术问题。技术方案是利用薄膜夹层装置生长晶体，晶体生长完毕后，在室温条件下利用涡流管系统对衍射环境温度进行控制，对晶体进行原位衍射。本发明实现了蛋白质晶体的近生理状态衍射，获得了‑5℃～20℃范围内的最佳分辨率。由于在室温条件下对蛋白质晶体进行衍射，大幅节省了成本。另外，在当代光源条件，本发明方法实现了快速室温数据收集，相比于背景技术的弱衍射光源条件，利用毛细管进行室温数据收集的技术，大大缩短了衍射时间。

主权项

1.一种近生理状态生物大分子晶体的衍射方法，其特征在于包括以下步骤：第一步，将蛋白质溶解到缓冲液中，制得10～60mg/ml蛋白质溶液；第二步，将等体积的结晶沉淀剂溶液与蛋白质溶液混合，获得蛋白质结晶混合液；第三步，吸取2μL蛋白质结晶混合液加入到薄膜夹层装置中；第四步，将以上含有蛋白质结晶混合液的薄膜夹层装置放入4～20℃控温箱中，结晶2～7天；第五步，结晶完毕后，在显微镜下观察蛋白质晶体的形貌；第六步，调节涡流管热流端的流量调节阀对出风口温度进行调节，同时使用热敏电偶对温度进行实时监测；第七步，选取形貌良好的晶体，在‑5℃～20℃温度范围内，在X射线单晶衍射仪或同步辐射衍射设施上对晶体进行原位衍射。