[发明专利]一种锦葵素-3-O-半乳糖苷的分离纯化方法及其应用

摘要

本发明公开了一种锦葵素‑3‑O‑半乳糖苷的分离纯化方法及其在制备α‑葡萄糖苷酶抑制剂中的应用，该分离纯化方法以花色苷组成复杂的蓝莓为原料，包括醇提浓缩、大孔树脂吸附、制备液相色谱纯化和高速逆流色谱分离，通过将制备液相色谱和高速逆流色谱技术结合，再通过对工艺参数的优化，分离制备得到高纯度的锦葵素‑3‑O‑半乳糖苷单体，纯度高达99％；经活性试验发现，该锦葵素‑3‑O‑半乳糖苷单体能够显著抑制α‑葡萄糖苷酶的活性，可用于制备α‑葡萄糖苷酶抑制剂。

主权项

1.一种锦葵素‑3‑O‑半乳糖苷的分离纯化方法，其特征在于，包括：(1)醇提浓缩：以蓝莓为原料，经醇提浓缩得到蓝莓花色苷粗提液；(2)大孔树脂吸附：将所述蓝莓花色苷粗提液注入大孔树脂，经洗脱及后处理得到蓝莓花色苷提取物冻干粉；(3)制备液相色谱纯化：采用C18色谱柱，经流动相进行梯度洗脱，再经后处理得到锦葵素‑3‑O‑半乳糖苷粗品冻干粉；所述流动相：A相为纯甲醇或酸的体积百分浓度为0.1～1.5％的酸‑甲醇体系，B相为甲酸体积百分浓度为1.5～5％的甲酸‑水体系；所述梯度洗脱的程序为：A相的体积百分浓度在0～5min内保持5％不变，在5～30min内从5％上升至60％，收集21～22min的洗脱物；(4)高速逆流色谱分离：以正丁醇‑甲基叔丁基醚‑甲醇‑水‑三氟乙酸为两相溶剂体系，经分离得到锦葵素‑3‑O‑半乳糖苷单体；所述正丁醇、甲基叔丁基醚、甲醇、水和三氟乙酸的体积比为2：2：1：5：0.01～0.1。