[发明专利]一种铜绿微囊藻生长周期内微囊藻毒素MC-LR快速定量方法在审
申请号: | 201810398627.5 | 申请日: | 2018-04-28 |
公开(公告)号: | CN108845043A | 公开(公告)日: | 2018-11-20 |
发明(设计)人: | 王春晖;叶璟;陈佳文;黄晨 | 申请(专利权)人: | 上海应用技术大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/74;G01N21/31;G01N15/10 |
代理公司: | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人: | 杨军 |
地址: | 200235 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种铜绿微囊藻生长周期内微囊藻毒素MC‑LR快速定量方法,采用高效液相色谱仪测定刚接种后的铜绿微囊藻生长周期96h内MC‑LR浓度,同时分别在显微镜下利用血球计数板计算藻细胞数量,用紫外分光光度计对铜绿微囊藻进行680nm吸光度测定,分别建立藻毒素,吸光度及藻细胞数的正比例线性关系;在随后的藻毒素毒理实验中,通过测定生长周期96h内铜绿微囊藻的吸光度或藻细胞数量,便可定量得出同时期藻毒素MC‑LR浓度;本发明同现有技术相比,具有快速、低成本、样品损耗小和无毒害等优点,能够解决传统的铜绿微囊藻藻毒素MC‑LR定量方法中存在的效率低、成本高、样品损耗多和操作人员安全性等技术问题。 | ||
搜索关键词: | 铜绿微囊藻 生长周期 藻毒素 藻细胞 快速定量 吸光度 微囊藻毒素MC-LR 高效液相色谱仪 紫外分光光度计 人员安全性 微囊藻毒素 吸光度测定 血球计数板 毒理实验 线性关系 传统的 低成本 显微镜 接种 毒害 | ||
【主权项】:
1.一种铜绿微囊藻生长周期内微囊藻毒素MC‑LR快速定量方法,其特征在于,包括如下步骤:1)铜绿微囊藻藻毒素MC‑LR的高效液相色谱测定将藻液样品经过处理后,通过高效液相色谱仪,测定样品的藻毒素MC‑LR浓度,其中,藻液样品均属铜绿微囊藻,在新接种后培养箱培养条件下,自接种开始生长至96h内的不同时间段取样;2)铜绿微囊藻藻液样品紫外吸光度的测定将藻液样品移入比色皿中,利用紫外分光光度计,双蒸水调零,在680nm测出对应样品的吸光度;3)铜绿微囊藻藻液样品藻细胞数量的测定将少许藻液样品移入血球计数板计数室,通过光学显微镜40倍下观察计数,计算出藻细胞数量;4)建立藻毒素浓度、吸光度及藻细胞数的互相联系将步骤1)至步骤3)测定的藻毒素MC‑LR浓度、吸光度以及藻细胞个数数据进行处理,并分别建立正比例线性关系。
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