[发明专利]一种金属离子标记的免疫反应双脉冲检测方法

摘要

本发明公开了一种金属离子标记的免疫反应双脉冲检测方法，通过采用电感耦合等离子体或微波等离子体质谱分析技术实现了双脉冲信号检测方法，通过采用金属纳米颗粒标记免疫反应，进一步利用电感耦合等离子体或微波等离子体质谱分析技术检测标记免疫反应的金属离子的脉冲信号，从而实现间接检测待测物的目的。

主权项

1.一种金属离子标记的免疫反应双脉冲检测方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将含有待测物的样本、具有特异亲和性一对物质中的一个标记的待测物完全抗原、小纳米颗粒标记的待测物的一株抗体加入到反应池中，孵育1‑120min，形成小纳米颗粒标记的第一免疫复合物和一端标记小纳米颗粒、另一端标记具有特异亲和性的一对物质中的一个的第二免疫复合物；2)然后向步骤1)反应后的混合物中加入具有特异亲和性的一对物质中的另一个标记的大纳米微球，标记在第二免疫复合物一端的具有特异亲和性一对物质中的一个与标记在大纳米微球表面的具有特异亲和性一对物质中的另一个进行特异性结合，形成大纳米微球外表面结合了大量的步骤1)中的第二免疫复合物；3)最后将步骤2)中反应后的混合物加入到配套的仪器中，大纳米微球中的特征金属元素、大纳米微球表面结合的第二免疫复合物上小纳米颗粒中特征金属元素以及未参加反应的待测物的一株抗体上小纳米颗粒特征金属元素会同时产生强脉冲强度信号，配套仪器中的检测器同时捕获两种金属元素的信号，采用双脉冲信号同步分析手段，通过大纳米微球中特征金属元素的脉冲信号来识别小纳米颗粒中特征金属元素的脉冲信号，并进一步滤除第一免疫复合物上小纳米颗粒中的特征金属元素的脉冲信号和未参加反应的待测物的一株抗体上的小纳米颗粒中特征金属元素的脉冲信号来获得大纳米微球表面结合的大量第二免疫复合物上小纳米颗粒中特征金属元素的脉冲信号；大纳米微球表面结合的大量第二免疫复合物上小纳米颗粒中特征金属元素脉冲信号的数量与待测物的含量具有负相关性，通过待测物的标准曲线计算能够获得样本中待测物的含量。