[发明专利]一种水蛭素改性抗凝血材料的制备方法

摘要

本发明涉及生物医用材料制备技术领域，具体涉及一种水蛭素改性抗凝血材料的制备方法。本发明将蜘蛛提取液、壳聚糖、桑黄多糖、葡萄糖等混合得到诱导液，将诱导液灌入猪小肠中，用宽体金线蛭吸吮诱导液增重，挤压出宽体金线蛭唾液得到纯化滤液，将丝素蛋白溶液、明胶液、盐酸四环素、纯化滤液混合、超滤得到浓缩液，最后经过冷冻干燥得到水蛭素改性抗凝血材料，明胶液中含有多种蛋白质和维生素，能对基体起到补充营养的作用，鱼鳞所含的不饱和脂肪酸，可以抑制血液中血蛋白的氧化，从而避免发生凝血效应，水蛭素能抗凝血、抗血栓形成，还能抑制凝血酶诱导的成纤维细胞的增殖和凝血酶对内皮细胞的刺激，应用前景广阔。

主权项

1.一种水蛭素改性抗凝血材料的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）取100～150g活体蜘蛛用胶体磨匀浆2～3次，将所得浆液用筛网过滤，分离得到的滤液即为蜘蛛提取液，取120～150mL上述的蜘蛛提取液、60～80g壳聚糖、4～5g桑黄多糖和12～15g葡萄糖混合，再用蒸馏水稀释至4～5L，搅拌溶解得到诱导液；（2）将上述诱导液灌入去除内容物后的猪小肠内，将一段猪小肠灌满诱导液，用线扎紧肠管两端使其膨胀，得到含诱导液的肠管，将400～500g宽体金线蛭分散置于玻璃槽中，将含诱导液肠管平铺在玻璃槽中，让宽体金线蛭自由吸吮小肠内的诱导液后取出；（3）人工挤压出宽体金线蛭唾液，得到天然水蛭素粗品，将天然水蛭素粗品用筛网过滤，将分离得到的滤液放入烧杯中，再将烧杯置于恒温水浴中加热，冷却后用筛网过滤去除滤渣，分离得到纯化滤液；（4）将20～25g干燥的丝素蛋白分散于200～300mL氢氧化钠溶液中，加热升温，保温得到分散液，冷却至室温后向分散液中继续滴加90～100mL醋酸溶液，得丝素蛋白溶液；（5）取40～50g草鱼干鱼鳞加入装有400～450mL无菌去离子水的烧杯中，将烧杯水浴加热，升温，再将4～5g胰蛋白酶加入烧杯中，保温酶解，过滤去除滤液，得到酶解鱼鳞，将酶解鱼鳞用去离子水洗涤3～5次，再将洗涤后的酶解鱼鳞与去离子水混合，水浴加热升温，灭酶，降温，保温浓缩得到明胶液；（6）将200～220mL丝素蛋白溶液、80～100mL明胶液、2～3g盐酸四环素和400～500mL纯化滤液混合，用超滤膜进行超滤，得浓缩液，将浓缩液置于冷冻干燥机中，冷冻干燥得到水蛭素改性抗凝血材料。