[发明专利]一种兼具抑菌与生物诱导作用的胶原水凝胶制备方法

摘要

本发明公开了一种兼具抑菌与生物诱导作用的胶原水凝胶制备方法，包括以下步骤：未改性胶原水凝胶的制备；胶原水凝胶的后处理；父本采取俯视为三角形栽插方式。本发明的优点在于：避免了重金属对胶原自身的失活与变性作用，通过引入人体必需的精氨酸，进行胍基化反应，在保持抑菌功效的同时，保留了胶原良好的生物诱导作用；避免了多酚对胶原水凝胶生物相容性的影响，采用的偶联剂亦是学术上业已认可的生物相容性良好的交联剂EDC·HCl及NHS且反应条件温和，温度在4～10℃，在胶原自身变性温度以下，有效保证了胶原的生物诱导作用不被破坏。

主权项

1.一种兼具抑菌与生物诱导作用的胶原水凝胶制备方法，其特征在于，制备步骤如下：步骤1，未改性胶原水凝胶的制备：在4～10℃下将胶原溶解于0.5M乙酸中，得到5mg/ml～20mg/ml的胶原溶液，随后在4℃下采用NaOH溶液缓慢调节胶原溶液pH值至6.5～8.5，接着将胶原溶液置于37～42℃的恒温箱中孵化1～4h，即得到未改性胶原水凝胶；所述胶原为酸溶性的猪皮、牛皮、羊皮、鱼皮、驴皮等动物皮胶原中的一种或几种的混合物；步骤2，将精氨酸引入未改性胶原水凝胶：首先称取干重10～20g的未改性胶原水凝胶在0～10℃的条件下浸没于体积为1L、浓度为25～50mmol/L的MES缓冲液中，其pH＝5.0；然后称取EDC·HCl及NHS，其用量按摩尔比n(EDC)：n(NHS)：n(胶原水凝胶中的‑COOH)＝5:3:2的比例加入上述MES缓冲液中；随后，将精氨酸按照EDC·HCl物摩尔质量的1/4～1/2加入到MES缓冲溶液中，在4℃的条件下搅拌12h～48h后，加入干重1～10wt％的盐酸羟胺终止反应，并采用NaOH溶液调节pH至9.0；步骤3胶原水凝胶的后处理：将上述制备的胶原水凝胶在6000～8000道尔顿截留分子量的透析袋中透析12‑36h，进一步除去未反应的化学小分子试剂，并冷冻干燥、钴‑60射线灭菌装袋即得到兼具抑菌与生物诱导作用的胶原水凝胶材料，钴‑60射线灭菌强度为15～30KGy。