[发明专利]一种从孕妇外周血中分离游离胎儿细胞的方法

摘要

本发明涉及一种从孕妇外周血中分离游离胎儿细胞的方法。该方法利用微流控芯片的细胞分离作用以及特异性亲和识别原理，实现了孕妇外周血中游离胎儿细胞(胎儿有核红细胞、滋养层细胞等)的高效率、高纯度捕获分离。在微流控芯片内，设计了具有特定几何排布方式的微阵列结构，以及修饰上具有亲和识别作用的分子基团如核酸适体、抗体、多肽等。调节微阵列结构的参数，可以调控不同尺寸的胎儿细胞与微阵列的碰撞效率，进而实现不同尺寸胎儿细胞的捕获富集。

主权项

1.一种从孕妇外周血中分离游离胎儿细胞的方法，包括如下步骤：1)制备用于胎儿细胞捕获的微流控芯片；该微流控芯片设计含有至少一个进样口和至少一个出样口；进样口和出样口之间为具有特定几何排布的微阵列；所述的特定几何排布为，微流控芯片的整体临界尺寸设为Dc，其由公式Dc＝1.4×G×(Δλ/λ)0.48设定，其中，柱子间的水平间距设为G，其大小在0到50微米之间；同一行中三角形垂心之间的距离设为λ，其大小在100‑150微米之间；同一行中第二个三角形相较于第一个三角形的向上偏移值设为Δλ，其大小在0到20微米之间；微流控芯片的整体临界尺寸设为Dc；2)在所述微阵列表面修饰胎儿细胞特异性识分子；3)调控微阵列的临界直径为0‑50微米、流速为0‑10mL/h，使得微流控芯片的细胞捕获效率达到最优；4)将2‑10毫升孕妇外周血进行梯度离心分离，获得单核细胞；5)将步骤4)得到的单核细胞重悬于磷酸盐缓冲液中，注入到微流控芯片中进行胎儿细胞的捕获。