[发明专利]低温乙醇两步法分离的人血白蛋白

摘要

本发明提供了一种两步低温乙醇法分离法生产的人血白蛋白，其特征在于人血白蛋白的低温乙醇分离工艺中没有组分Ⅳ沉淀的分离步骤，组分I+Ⅱ+Ⅲ沉淀后直接分离组分V沉淀，通过超滤保留超滤滤过液的方法超滤除去大分子的杂蛋白，然后是对人血白蛋白超滤除去小分子的蛋白及残留乙醇、可能的铝离子。采用该工艺后的人血白蛋白产品的特点是，生产过程的管理严格执符合GMP要求，不存在返工或再加工生产，并且有较高的人血白蛋白产品得率，在现有基础上每1吨血浆的人血白蛋白产品生产得率提高12%。

主权项

1.本专利提供了一种两步低温乙醇法工艺分离的人血白蛋白制品，该两步法低温乙醇工艺的人血白蛋白的产品特征在于：人血白蛋白的低温乙醇分离工艺中没有组分Ⅳ沉淀的分离步骤，以健康人血浆为原料，分离组分I+Ⅱ+Ⅲ沉淀之后直接分离组分V沉淀，超滤生产包括两步，首先是超滤保留超滤滤过液，超滤除去大分子的杂蛋白，然后是对人血白蛋白超滤除去小分子的蛋白及残留乙醇、可能的铝离子，其生产工艺特征为包括以下的生产步骤：（1） 冷沉淀分离：温度0℃至6.0℃，维持1.0℃至5.0℃，用800 rpm至3000rpm的速度离心6分钟至20分钟，分离冷沉淀；（2） 低温乙醇第一步分离（分离Cohn组分I、组分Ⅱ、组分Ⅲ）的工艺参数为：pH为6.5至7.8、乙醇含量为15%至24%、温度控制为‑6.0℃至‑2.5℃，蛋白质浓度范围为：4.0%至7.8%；（3） 低温乙醇第二步分离（分离Cohn组分V）的工艺参数为：pH为3.5至5.8、乙醇含量为35%至54%、温度控制为‑10.0℃至‑4.5℃，蛋白质浓度范围为：0.6%至4.8%：（4） 超滤第一步分离：采用高分子截留量（如80KD至100KD）超滤除去高分子杂蛋白，按照超滤的平均速度计算，将拟去除的高分子溶液超滤2至10遍，确保高分子蛋白溶液中几乎没有白蛋白分子；（5） 超滤第二步分离：采用低分子截留量（如10KD至30KD）超滤除去小分子杂蛋白及小分子如乙醇及铝残留物，前3至6次为相同温度等体积的0.9%氯化钠溶液超滤，后3至6次为相同温度等体积的注射用水超滤，超滤完成后，进行超滤浓缩，浓缩至所需要的蛋白质浓度，如20至30%；（6） 巴氏病毒灭活：超滤浓缩后的白蛋白溶液进行配制，确保辛酸钠含量和渗透压摩尔浓度接近人体正常血浆渗透压摩尔浓度之后，进行60℃10小时巴氏病毒灭活；（7）除菌过滤和无菌灌装生产，后进行30℃至32℃21天培育并灯检合格后包装入库；（8）按《中国药典》人血白蛋白产品标准检验合格并经批签发后上市销售；其产品的质量特征包括有：（1）蛋白质的纯度不小于96%；（2）其他指标符合《中国药典》人血白蛋白产品的质量标准。