[发明专利]检测土壤中三七成分的环介导等温扩增荧光检测方法、引物及试剂盒及应用在审
| 申请号： | 201810247557.3 | 申请日： | 2018-03-23 |
| 公开（公告）号： | CN108456741A | 公开（公告）日： | 2018-08-28 |
| 发明（设计）人： | 卢迎春;贾兵;张广辉;陈军文;杨生超;宋婉玲;朱书生;朱有勇;陈中坚;魏富刚;张强皓;韦海南 | 申请（专利权）人： | 云南农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司： | 昆明正原专利商标代理有限公司 53100 | 代理人： | 陈左;于洪 |
| 地址： | 650231*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明涉及检测土壤中三七成分的环介导等温扩增荧光检测方法、引物、试剂盒及应用，属于生物检测技术领域。本发明采用的是核酸体外快速扩增与荧光检测技术融合的新型技术，通过针对目的片段设计6条特异引物，使用有特殊活性的新型DNA聚合酶，通过扩增曲线实时监控整个等温扩增核酸复制的反应过程，对产物做溶解曲线分析。本发明建立检测三七成分环介导等温扩增方法，可对待检土壤中是否含有三七进行DNA层面的快速定性检测，大大缩减了检测使用时间，实现了三七策成分的快速检测，无需核酸提取，土壤样本简单裂解后即可上机实验，6条引物对应目标序列8个特异区域的识别保证了检测反应的高度特异性，具有良好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 环介导等温扩增 引物 检测 荧光检测 试剂盒 土壤 应用 溶解曲线分析 生物检测技术 荧光检测技术 等温扩增 定性检测 核酸复制 核酸提取 检测反应 快速检测 扩增曲线 目标序列 目的片段 上机实验 实时监控 特异引物 土壤样本 新型技术 核酸 扩增 裂解 体外 融合 保证 | ||
【主权项】：
1.检测土壤中三七成分的环介导等温扩增引物，其特征在于，包括外部引物对、内部引物对和环引物对；所述的外部引物对的序列为：上游外部引物F3：gtcaatcgttccgctgatat；下游外部引物B3：gctggtactccagaagaga；所述的内部引物对的序列为：上游内部引物FIP：atgcagttacaaccgctgtgagaccatcgtgtgcttgaa；下游内部引物BIP：cggcggtatgcttaggagatcgagttcatccatgcagtgat；所述的环引物对的序列为：上游环引物LF：gaaagctcttcgattgaaccg；下游环引物LB：tttctttaataagctgcctgcg。
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