[发明专利]无种质基因型限制高频体胚再生培养方法

摘要

本发明公开了无种质基因型限制高频体胚再生培养方法，包括以下步骤：1）选材及无菌芽苗的生长驯化培养；2）叶芽原基体细胞胚诱导的发生培养；3）胚状体增殖和生长培养；4）丛生芽的成苗快繁培养；5）壮苗生根培养；6）再生植株移栽及成活。本发明还公开了一种结缕草的高频体胚再生培养培养方法。本发明通过选择合适外植体、及依据外植体关键发育阶段及时调整培养基配方和激素成分浓度、及相应培养条件等，使这些因素达到良好相互协同作用，有效地克服了结缕草培养中不同种（品种）及基因型限制问题及高频体胚再生问题，大幅度提高体细胞胚发生频率和再生植株频率。

主权项

1.无种质基因型限制高频体胚再生培养方法，其特征在于，包括以下步骤：1）选材及无菌芽苗的生长驯化培养；2）叶芽原基体细胞胚诱导的发生培养：选取无菌苗茎节处开始萌动的叶芽原基作为外植体，切取叶芽原基转接到体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚的诱导，暗培养28±2d，所述体细胞胚诱导培养基，包括改良MS培养基、2～4mg/L 2,4-D、0.1～0.2mg/L NAA、0.05～0.1 mg/L 6-BA、40～50g/L蔗糖、0.6～0.7%琼脂，pH值为5.8~6.0；3）胚状体增殖和生长培养；4）丛生芽的成苗快繁培养；5）壮苗生根培养；6）再生植株移栽及成活。