[发明专利]一种多花黄精的茎尖组织培养繁殖育苗方法

摘要

本发明主要涉及中药组织培养繁殖育苗技术领域，公开了一种多花黄精的茎尖组织培养繁殖育苗方法，包括：材料选择、培养基制备、嫩芽消毒、嫩芽接种、培养管理、炼苗移植；本发明提供的多花黄精的茎尖组织培养繁殖育苗方法，方法简单，操作方便，生根率达到94%，移植后成活率达到96%，节约大量育苗成本；选择嫩芽作为组织培养的材料，能够进行光合作用，减少对培养基中营养成分的依赖，同时嫩芽采取后置于低温氨甲环酸溶液中进行浸泡，加快嫩芽细胞的分裂，提高嫩芽生根率；向MS培养基中加入甲钴胺和亚硒酸钠，能够抑制嫩芽上的杂菌生长，提高伤口处细胞的原生质活性，加快愈伤组织的形成和分化，提高育苗效率。

主权项

1.一种多花黄精的茎尖组织培养繁殖育苗方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）材料选择：选择性状优良的多花黄精，剪取嫩芽，流水冲洗40~60分钟，置于质量浓度为10~15mg/L的氨甲环酸溶液中，于6~8℃浸泡2~3小时，得培养嫩芽；（2）培养基制备：配置MS组织培养的固体培养基，加入甲钴胺和亚硒酸钠，使甲钴胺质量浓度为1.2~1.4mg/L，亚硒酸钠质量浓度为11~13mg/L，分装于培养瓶中，于121℃灭菌25~30分钟，自然冷却，得培养基；（3）嫩芽消毒：将培养嫩芽置于超净工作台中，先用体积分数为75%的酒精浸泡30~40秒，无菌水冲洗4~5次，再置于0.2%的升汞中浸泡10~15分钟，无菌水冲洗7~8次，得消毒嫩芽；（4）嫩芽接种：将消毒嫩芽的伤口处接触升汞的部位切除，将嫩茎全部扦插于培养基中，得接种嫩芽；（5）培养管理：1~15天，温度为26~27℃、湿度为94~96%、光照为300~400lx、光照时间为11~12小时/d；16~40天，温度为24~25℃、湿度为94~96%、光照为600~700lx、光照时间为12~13小时/d、每隔4小时用紫外灯照射8~10分钟；41~50天，嫩芽生根，温度为27~28℃、湿度为95~97%、光照为1200~1400lx、光照时间为12~13小时/d、每隔6小时用紫外灯照射15~20分钟，得生根苗；（6）炼苗移植：生根8~10天后，将生根苗的培养瓶打开，接受自然环境30~40分钟，以后每天延长20分钟，连续炼苗4~5天，即可移植于室外进行栽植，得移植多花黄精苗。