[发明专利]一种3位取代的十字孢碱类衍生物及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种3位取代的十字孢碱类衍生物，结构式如下式(I)所示，式中，R1选自H或OCH3；当R1为H时，R3选自H或i；当R1为H，R3为H时，R2选自OH、NH2或OCH2CH3；当R1为H，R3为i时，R2选自OH、NH2、F、OCH3、OCH2CH3、Cl或Br；当R1为OCH3时，R3为H，R2选自OH、NH2、F、OCH3、OCH2CH3、Cl或Br；本发明提供了一种新型的3位取代的十字孢碱类衍生物，由放线菌通过大米发酵及提纯后得到的天然产物，对蛋白激酶PKCα和ROCKII的活性具有明显的抑制作用，因此可制备用于治疗与蛋白激酶异常表达相关的各种疾病的药物。 1

主权项

1.一种3位取代的十字孢碱类衍生物，其特征在于，结构式如下式(I)所示：

式中，R₁选自H或OCH₃；

当R₁为H时，R₃选自H或

当R₁为H，R₃为H时，R₂选自OH、NH₂或OCH₂CH₃；

当R₁为H，R₃为时，R₂选自OH、NH₂、F、OCH₃、OCH₂CH₃、Cl或Br；

当R₁为OCH₃时，R₃为H，R₂选自OH、NH₂、F、OCH3、OCH₂CH₃、Cl或Br。

2.一种根据权利要求1所述的3位取代的十字孢碱类衍生物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将放线菌接种于高氏一号液体培养基中，摇床培养，得到种子液；

(2)将种子液接种于大米发酵培养基中，静置培养，得到固体发酵产物；

(3)固体发酵产物经分离纯化获得所述3位取代的十字孢碱类衍生物；

所述放线菌为链霉菌Streptomyces sp.，保藏号为CICC 11026。

3.根据权利要求2所述的3位取代的十字孢碱类衍生物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述摇床培养的条件为：20～35℃摇床培养2～5天。

4.根据权利要求2所述的3位取代的十字孢碱类衍生物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述大米发酵培养基由大米、水和海盐组成，大米、水与海盐的用量为40g：40～80mL：0.5～3g；

所述静置培养的条件为：23～33℃静置培养60～80天。

5.根据权利要求2所述的3位取代的十字孢碱类衍生物的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述分离纯化包括：

a)固体发酵产物经乙酸乙酯萃取，提取萃取液；

b)将萃取液浓缩后，经常压凝胶色谱粗分离，得到粗产物；

c)粗产物经中压制备液相色谱分离，再经高压制备液相色谱纯化。

6.根据权利要求5所述的3位取代的十字孢碱类衍生物的制备方法，其特征在于，步骤b)中，所述常压凝胶色谱的条件为：以羟丙基葡聚糖凝胶为填料，以体积百分数为20～100％的甲醇‑水体系为洗脱剂，进行梯度洗脱。

7.根据权利要求5所述的3位取代的十字孢碱类衍生物的制备方法，其特征在于，步骤c)中：

所述中压制备液相色谱，以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，以体积百分数为40～100％的甲醇/水体系为流动相，并以10mL/min进行梯度洗脱，经TLC分析后合并含目标化合物的洗脱产物；

所述高压制备液相色谱，以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，以体积百分数为20～48％的乙腈‑水溶液为流动相，并以10mL/min进行梯度洗脱，收集不同时间的色谱峰，回收溶剂，得到不同结构的3位取代的十字孢碱类衍生物。

8.一种根据权利要求1所述的3位取代的十字孢碱类衍生物在制备用于治疗与蛋白激酶异常表达相关疾病的药物中的应用，所述蛋白激酶包括PKCα和ROCKII；所述疾病包括与肿瘤相关的疾病和与神经性变性疾病相关的疾病。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：

所述3位取代的十字孢碱类衍生物的结构式(I)中，

R₁为H，R₂为OH，R₃为H；或者：

R₁为OCH₃，R₂为OH，R₃为H；或者：

R₁为H，R₂为OH，R₃为

所述疾病为由前列腺癌细胞PC3引起的前列腺癌。

10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：

所述蛋白激酶为ROCKII，

所述3位取代的十字孢碱类衍生物的结构式(I)中：R₁为H，R₂为OH，R₃为H；

所述疾病为与神经性变性疾病相关的疾病。