[发明专利]高效表达分泌β-甘露聚糖酶的重组枯草芽孢杆菌菌株及其获得方法在审
| 申请号： | 201810012118.4 | 申请日： | 2018-01-05 |
| 公开（公告）号： | CN110004166A | 公开（公告）日： | 2019-07-12 |
| 发明（设计）人： | 张大伟;付刚;宋亚凤 | 申请（专利权）人： | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N15/56 | 分类号： | C12N15/56;C12N15/75;C12N15/67;C12N9/24;C12N1/21;C12R1/125 |
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| 地址： | 300308 天*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种高效表达分泌β‑甘露聚糖酶的重组枯草芽孢杆菌菌株及其获得方法。具体是首先将经过密码子优化的β‑甘露聚糖酶基因克隆中pMA5载体中不同的信号肽序列下游，使其分泌到胞外；其次在宿主菌基因组上过表达分泌过程中涉及的限制因子；最后更换其表达载体上启动子，通过增强转录和翻译过程从而在蛋白质合成水平增加β‑甘露聚糖酶的生成。本发明中高效表达分泌β‑甘露聚糖酶的重组枯草芽孢杆菌利用2×SR培养基在37℃，220rpm条件下发酵生产甘露聚糖酶，72h发酵液中β‑甘露聚糖酶的酶活力最高可达2207U/mL，为具有良好应用前景的菌株。 | ||
| 搜索关键词： | 甘露聚糖酶 分泌 重组枯草芽孢杆菌 高效表达 菌株 分子生物学技术 甘露聚糖酶基因 宿主菌基因组 蛋白质合成 密码子优化 信号肽序列 表达载体 水平增加 培养基 转录 发酵液 酶活力 启动子 发酵 克隆 翻译 应用 生产 | ||
【主权项】：
1.经密码子优化的β‑甘露聚糖酶基因，其特征在于(I)或(II)：(I)SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列；(II)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经过1‑20个，优选1‑10个，更优选1‑5个，最优选1个核苷酸的取代、缺失或添加而获得的核苷酸序列，且获得的核苷酸序列编码蛋白具有β‑甘露聚糖酶的活性。
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