[发明专利]质谱鉴定副溶血性弧菌分型的方法及产品有效
| 申请号: | 201810005254.0 | 申请日: | 2018-01-03 |
| 公开(公告)号: | CN107988342B | 公开(公告)日: | 2021-04-27 |
| 发明(设计)人: | 马庆伟;钟逾;刘昕超 | 申请(专利权)人: | 北京毅新博创生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/686 | 分类号: | C12Q1/686;C12Q1/689;C12Q1/04;C12R1/63 |
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| 地址: | 102206 北京市昌平*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | 本发明公开了一种利用飞行时间质谱技术快速鉴定副溶血性弧菌分型的方法,主要包括如下步骤:使用特定引物组合对待测副溶血性弧菌的特征片段进行多重PCR扩增;将多重PCR产物通过吸附柱进行纯化;将纯化后的多重PCR产物点样于基质结晶上,通过质谱检测多重PCR产物的片段的大小;将质谱结果与副溶血性弧菌指纹图谱库比较,以确定待检副溶血性弧菌的具体分型。本发明还保护用于该方法中的质谱试剂盒。该方法可对环境卫生、食品安全检测、公共场所安全、进出口检验检疫等领域的副溶血性弧菌分型进行鉴定,以维护公共卫生安全。 | ||
| 搜索关键词: | 鉴定 溶血 弧菌 方法 产品 | ||
【主权项】:
一种质谱鉴定副溶血性弧菌分型的方法,步骤包括使用特定引物组合对待测副溶血性弧菌的特征片段进行多重PCR扩增;将多重PCR产物通过吸附柱进行纯化;将纯化后的多重PCR产物点样于基质结晶上,通过质谱检测多重PCR产物的片段的大小;将质谱结果与副溶血性弧菌指纹图谱库比较,以确定待检副溶血性弧菌的具体分型;其中,所述引物为扩增副溶血性弧菌的tlh基因片段的特异性引物的SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2,其扩增产物的质谱峰值为33708Da;扩增副溶血性弧菌的tdh基因片段的特异性引物的SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4,其扩增产物的质谱峰值为37250Da;扩增副溶血性弧菌的trh基因片段的特异性引物的SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6,其扩增产物的质谱峰值为42702Da。
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