[发明专利]增强的睡美人转座子、试剂盒和转座方法

摘要

本发明涉及增强的睡美人型转座子和转座方法。具体地，本发明涉及包含侧接左和右反向重复序列/同向重复序列(IR/DR)的货物核酸的多核苷酸，其中具有特异性序列的IR/DR被睡美人转座酶蛋白识别并且该多核苷酸能够整合到细胞的DNA中。本发明还涉及用于转座核酸的试剂盒，包含所述多核苷酸以及进一步的组分，如能够消除FACT(促进染色质转录)复合物的组分，即SSRP1和/或SUPT16H/SPT16的转座辅因子，或选自包括H，S，V和L的组的组织蛋白酶的抑制剂；或能够消除或抑制HSP90的辅因子；或在细胞周期阶段G0/G1，G1/S或G2/M中暂时阻滞细胞周期的因子；或抑制PCNA的泛素化的因子，或者其中这些组分已被敲减或抑制，或细胞周期在任何所述阶段被阻滞的细胞。可替代地或另外地，试剂盒可以包含作为转座辅因子的能够增加ATR的浓度和/或信号传导的试剂，或其中ATR的浓度和/或信号传导增加的细胞。本发明进一步提供了使用所述转座子多核苷酸以及宿主细胞和药物组合物的方法。其还涉及所述转座辅因子或特异性细胞用于增强转座效率，例如，用于制备遗传修饰的核酸或细胞的用途。

主权项

1.一种多核苷酸或其互补多核苷酸，包含含有由左和右反向重复序列/同向重复序列(IR/DR)侧接的货物核酸的转座子，其中(i)所述转座子能够由睡美人转座酶蛋白调动；(ii)左IR/DR包含外部左DR基序和内部左DR基序，其中所述外部左DR基序包含SEQ ID NO:1的核苷酸序列，并且所述内部左DR基序包含SEQ ID NO:2的核苷酸序列；和(iii)右IR/DR包含外部右DR基序和内部右DR基序，其中所述外部右DR基序包含SEQ ID NO:1的核苷酸序列的反向互补序列，并且所述内部右DR基序包含SEQ ID NO:2的核苷酸序列的反向互补序列。