[发明专利]树鼩细胞免疫表型分析中外周血红细胞裂解方法在审
| 申请号： | 201711377985.X | 申请日： | 2017-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN108279145A | 公开（公告）日： | 2018-07-13 |
| 发明（设计）人： | 刘红旗;李昕潼;陶玉芬;陆巍;刘建生;代解杰 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院医学生物学研究所 |
| 主分类号： | G01N1/28 | 分类号： | G01N1/28;G01N15/14 |
| 代理公司： | 北京知本村知识产权代理事务所 11039 | 代理人： | 刘江良 |
| 地址： | 650118 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明涉及树鼩外周血(PB)红细胞裂解方法。其通过 BD Pharm LyseTM两次裂解树鼩全血，并对裂解条件即裂解时间、裂解次数以及裂解液与全血的体积比进行了优化，建立了优化的用于树鼩外周血细胞免疫表型分析的红细胞裂解方案，为进一步研究树鼩实验动物的免疫系统和免疫应答的评估提供了重要的技术平台。 | ||
| 搜索关键词： | 裂解 红细胞 全血 免疫表型分析 细胞免疫表型 外周血细胞 技术平台 裂解条件 免疫系统 免疫应答 实验动物 血红细胞 裂解液 体积比 外周血 优化 评估 分析 研究 | ||
【主权项】：
1.一种树鼩外周血红细胞裂解方法，其特征在于：包括如下步骤：从树鼩尾静脉采集全血；2）将8‑12倍体积的1x BD Pharm LyseTM加入到树鼩全血中；3）立即进行轻柔涡旋混匀；4）在室温下避光孵育10‑20分钟；5）室温于180‑220离心，离心时间5分钟；6）吸去上清液，不破坏沉淀；7）用与初始全血相同体积的染色缓冲液重悬细胞沉淀；8）加入以上细胞悬液8‑12体积的1x BD Pharm LyseTM；9）立即进行轻柔涡旋混匀；10）室温避光孵育3‑7分钟；11）室温于180‑220离心，离心时间5分钟；12）吸去上清液，不要打散沉淀；13）用染色缓冲液重悬沉淀备用。
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