[发明专利]一种蜜环菌硒锗多糖的制备方法

摘要

本发明提供了一种蜜环菌硒锗多糖的制备方法，包括以下步骤：S1、种子液制备；S2、蜜环菌静置培养；S3、蜜环菌菌索干粉制备；S4、硒锗多糖提取。本发明利用蜜环菌的生物转化作用，将无机硒和无机锗在不同时段分别加入到培养液中进行生物转化，将有机硒和有机锗富集到菌丝体多糖中，所制备的蜜环菌多糖同时含有硒和锗。本发明，方法简单易行，成本低，所制备的硒锗多糖同时具有硒多糖和锗多糖的双重生物学功效。

主权项

一种蜜环菌硒锗多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、种子液制备将蜜环菌菌种接到PDA培养基斜面上，15‑35℃静置培养活化，待菌索长满试管；将蜜环菌菌索接种于PDA液体培养基中，15‑35℃静置培养15‑25d，4℃保存待用；S2、蜜环菌静置培养按照1％‑10％接种量，将种子液接入综合PDA液体培养基中，同时加入50‑700mg/L已灭菌的二氧化锗，15‑35℃培养箱静置培养，培养至168‑192h；然后再加入已灭菌的浓度为50‑200mg/L的亚硒酸钠溶液，15‑35℃培养箱继续静置培养至21‑30d；S3、蜜环菌菌索干粉制备用纱布过滤培养好的蜜环菌，并用蒸馏水冲洗，得湿菌体，烘干并粉碎，得到蜜环菌菌索干粉；S4、硒锗多糖提取取蜜环菌菌索干粉，按照1:10‑1:50固液比(g：mL)加入蒸馏水，搅拌均匀，于80‑100℃水浴中保温4‑6个小时，同时进行超声破碎，水浴完成后，3500‑10000r/min离心10‑20min，取第一次上清液；将取第一次上清液后的沉淀物重复上述步骤取多次上清液；将多次上清液合并，加入总体积3倍的无水乙醇，于4℃静置沉淀24‑48h；3500‑10000r/min离心后，取沉淀，80℃‑100℃烘干4‑6h，产出蜜环菌硒锗粗多糖样品。