[发明专利]一种小麦成熟胚组织培养方法及其应用

摘要

本发明公开了一种小麦成熟胚的组织培养方法，包括如下步骤小麦种子灭菌，分离成熟胚，愈伤组织诱导培养，分化培养。本发明提供的小麦成熟胚组织培养方法，其愈伤组织诱导培养基在MS基本培养基中添加了一定比例的克菌丹、色氨酸、丝氨酸激发愈伤组织本身分化能力，提高植株再生能力，显著提高愈伤组织中结构致密的胚性愈伤组织的生长状态，提高成熟胚愈伤组织的分化率。

主权项

一种小麦成熟胚组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：小麦种子预处理选择当年收获的发育成熟、籽粒饱满、无破损的小麦种子，用质量浓度1～2％的双氧水浸泡6～10min，不时摇晃除菌，然后用超纯水冲洗2～4次，每次2分钟，置于无菌湿润滤纸上，30～33℃暗培养2～3小时；S2：愈伤组织诱导培养取经过预处理的小麦种子，在胚上纵切一刀，横切两刀，腹沟向下接种在诱愈培养基浸润的发芽纸上，黑暗条件26℃/24h培养8～12天，挑选胚性愈伤组织，每2周继代一次；所述诱愈培养基的配方为：每升诱愈培养基中含有1.0～2.0mg/L 2,4‑二氯苯氧乙酸、0.10g/L克菌丹、2mg/L色氨酸、10mg/L丝氨酸，20～25g/L蔗糖，其余为基础MS培养基，且诱愈培养基的pH为6.2；S3：分化培养选取挑选的胚性愈伤组织，转入分化培养基，黑暗条件25℃/24h培养6天后，第7天转入25℃接受光照，光照强度为75～125μmol m‑2/S，光照时间12h/d，共经过21‑28d的分化培养，得到小麦再生植株；所述分化培养基的配方为：每升分化培养基中含有40g/L香蕉泥、2mg/L色氨酸、10mg/L赖氨酸，其余为基础MS培养基，且分化培养基的pH为5.8～6.0。