[发明专利]一种肠衣副产物肝素钠的最佳制取工艺

摘要

本发明涉及一种肠衣副产物肝素钠的最佳制取工艺，该最佳制取工艺包括如下步骤（1）原料处理；（2）酶解提取；（3）絮凝处理；（4）树脂吸附；（5）树脂洗涤；（6）肝素洗脱；（7）醇沉；（8）肝素钠粗品复溶；（9）超滤；（10）脱色；（11）氧化、醇沉和干燥。本发明的优点在于本发明制取工艺能够水解完全、产品纯度高及收率高。

主权项

一种肠衣副产物肝素钠的最佳制取工艺，其特征在于：所述最佳制取工艺包括如下步骤：（1）原料处理：将新鲜的猪肠用清水仔细清洗去除内外污物和外部皮肤脂肪后，绞碎成肉糜状；（2）酶解提取：向步骤（1）中得到的肉糜状中加入8～10倍的水，再加入2%～3%的胰蛋白酶，加30%～40%的NaOH调节pH至8～9之间，搅拌反应40～60min后，再加入3%～5%的NaCl，置于反应锅中，提取时间为10～16min，结束后，过滤，得到酶解液；（3）絮凝处理：在上述酶解液中加入3%～5%的壳聚糖絮凝剂，以100～110r/min的速度搅拌混合液20～30min，室温静置4～6h后，送入离心机离心过滤，得到含有肝素钠的上清液；（4）树脂吸附：采用强碱性阴离子交换树脂吸附上清液，树脂的用量占母液的质量比为0.8%～1.2%，搅拌吸附7～9h，然后收集强碱性阴离子交换树脂，弃去废液；（5）树脂洗涤：先用自来水及温水洗涤，然后用4～6度的盐水溶液洗涤强碱性阴离子交换树脂30～40min，以去除树脂表面杂质；（6）肝素洗脱：以3～4倍体积的5%～8%的氯化钠溶液洗脱上树脂，洗脱时间为3～4h，再用2倍体积的3%～5%的氯化钠溶液洗脱3～5h，将两次洗脱液合并；（7）醇沉：将上述洗脱液，加入2～3倍体积的80%～90%的乙醇，搅拌20～30min，然后沉淀处理20～24h，收集沉淀物，干燥后得到肝素钠粗品；（8）肝素钠粗品复溶：将肝素钠粗品溶解于水中，加入体积比为1～3%的氯化钠溶液和0.5～0.9%的碱性蛋白酶，在30～40℃下搅拌2～3h，酶解后，采用高速离心机，以7000～8000r/min的转速，时间为16～20min离心除杂质，得到酶解液；（9）超滤：将上述酶解液使用孔径为8000～10000分子量的中空纤维超滤膜，在0.1～0.2MPa的压力下进行膜过滤，除去蛋白质和菌丝体；（10）脱色：将步骤（9）所得滤液加入3～4wt%的大孔吸附树脂，在常温下，搅拌混合液，脱色处理3～5h后，过滤除树脂，收集澄清的滤液，吸附色素的树脂用有机溶剂洗脱，再以清水漂洗下次备用；（11）氧化、醇沉和干燥：将步骤（10）所得的脱色滤液，按照常规的氧化、醇沉和干燥步骤处理得到精制的肝素钠。