[发明专利]1,3‑二甲基‑5,6‑二氨基脲嘧啶的高效液相色谱分析方法

摘要

本发明涉及一种1,3‑二甲基‑5,6‑二氨基脲嘧啶(二甲基‑DAU)的高效液相色谱分析方法，包括分析原料的预处理，高效液相色谱的分析条件及定性、定量方法。分析原料的预处理包括热滤取样，超声，流动相稀释；色谱分析条件为进样量20μL；流动相为体积比为955的0.02mol/L的磷酸二氢钾和乙腈，流速为1ml/min；色谱柱为Syncronis C‑18柱250mm×4.6mm，柱温25℃；检测器为紫外检测器，检测波长为275‑300nm；二甲基‑DAU的停留时间为5.66min；所用定量方法为外标法。本发明方法操作简单，成本低，可以快速、高效、准确地对二甲基‑DAU进行分析。

主权项

一种1,3‑二甲基‑5,6‑二氨基脲嘧啶的高效液相色谱分析方法，其特征在于按照以下步骤操作：第一步，分析原料的预处理：将二甲基‑DAU分析原料热过滤，取样，超声5min，二甲基‑DAU分析原料用流动相稀释2500倍或者5000倍，得到二甲基‑DAU分析样品，所述流动相为体积比为95:5的0.02mol/L磷酸二氢钾和乙腈；第二步，二甲基‑DAU的高效液相色谱分析：将二甲基‑DAU分析样品通过高效液相色谱检测，液相色谱进样量为20μL，液相色谱流动相为0.02mol/L的磷酸二氢钾和乙腈的溶液，0.02mol/L磷酸二氢钾和乙腈的体积比为95:5，pH＝2.68，流速为1ml/min；色谱柱采用Syncronis C‑18柱250mm×4.6mm，色谱柱温度为25℃，液相色谱的检测器为紫外检测器；根据纯二甲基‑DAU的光谱图，紫外检测器的检测波长为275nm‑300nm，二甲基‑DAU的停留时间为5.66min，二甲基‑DAU的定量方法为外标法，在室温下于精密天平上分别称量0.2g、0.3g、0.4g，0.5g纯品二甲基‑DAU，精确记录质量，分别于1L容量瓶中定容，配成二甲基‑DAU标准溶液；f＝标样浓度(mg/L)/标样峰面积，f为一系列二甲基‑DAU标样的浓度对其各自峰面积作图的直线的斜率，称为f因子，样品百分含量＝样品峰面积×f×稀释倍数/取样量/10000；所述二甲基‑DAU为1，3‑二甲基‑5，6‑二氨基脲嘧啶的简称。