[发明专利]一种通过内皮细胞来源的外泌体扩增神经干细胞的方法有效

专利信息
申请号: 201711079194.9 申请日: 2017-11-06
公开(公告)号: CN107937342B 公开(公告)日: 2021-07-06
发明(设计)人: 张一哲;郑敏化;韩骅 申请(专利权)人: 中国人民解放军第四军医大学
主分类号: C12N5/0797 分类号: C12N5/0797;C12N5/071
代理公司: 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 代理人: 汤东凤
地址: 710032 陕西*** 国省代码: 陕西;61
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摘要: 发明公开了一种利用内皮细胞来源的外泌体扩增神经干细胞的方法,使用无血清培养基培养P3‑P4代的人原代内皮细胞72小时后,收集培养基上清液;将培养上清液离心后,再经滤膜过滤,加入终浓度为12%的聚乙二醇6000并混匀;混匀后12小时进行转速为12000g/分钟的1小时离心,从而得到外泌体;将人原代血管内皮细胞来源的外泌体加入小鼠神经干细胞中,共孵育12小时,培养5天后,神经干细胞自我更新及增殖能力增强;本发明的方法操作简便,耗时短,并能维持NSCs的正常干细胞特性与多向分化潜能,为以NSCs为细胞来源的干细胞替代疗法提供充足的细胞量。
搜索关键词: 一种 通过 内皮 细胞 来源 外泌体 扩增 神经 干细胞 方法
【主权项】:
一种体外扩增神经干细胞的方法,其特征在于:(1)使用无血清培养基培养P3‑P4代的人原代脐静脉内皮细胞,收集培养基上清液;(2)将培养上清液离心,再经滤膜过滤及聚乙二醇6000混匀后,12000g/分钟离心1小时,从而得到外泌体;(3)将外泌体加入小鼠神经干细胞中,浓度为10μg/ml,孵育时间为12小时,培养5天,实现体外扩增神经干细胞。
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