[发明专利]一种通过内皮细胞来源的外泌体扩增神经干细胞的方法有效
申请号: | 201711079194.9 | 申请日: | 2017-11-06 |
公开(公告)号: | CN107937342B | 公开(公告)日: | 2021-07-06 |
发明(设计)人: | 张一哲;郑敏化;韩骅 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第四军医大学 |
主分类号: | C12N5/0797 | 分类号: | C12N5/0797;C12N5/071 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 710032 陕西*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了一种利用内皮细胞来源的外泌体扩增神经干细胞的方法,使用无血清培养基培养P3‑P4代的人原代内皮细胞72小时后,收集培养基上清液;将培养上清液离心后,再经滤膜过滤,加入终浓度为12%的聚乙二醇6000并混匀;混匀后12小时进行转速为12000g/分钟的1小时离心,从而得到外泌体;将人原代血管内皮细胞来源的外泌体加入小鼠神经干细胞中,共孵育12小时,培养5天后,神经干细胞自我更新及增殖能力增强;本发明的方法操作简便,耗时短,并能维持NSCs的正常干细胞特性与多向分化潜能,为以NSCs为细胞来源的干细胞替代疗法提供充足的细胞量。 | ||
搜索关键词: | 一种 通过 内皮 细胞 来源 外泌体 扩增 神经 干细胞 方法 | ||
【主权项】:
一种体外扩增神经干细胞的方法,其特征在于:(1)使用无血清培养基培养P3‑P4代的人原代脐静脉内皮细胞,收集培养基上清液;(2)将培养上清液离心,再经滤膜过滤及聚乙二醇6000混匀后,12000g/分钟离心1小时,从而得到外泌体;(3)将外泌体加入小鼠神经干细胞中,浓度为10μg/ml,孵育时间为12小时,培养5天,实现体外扩增神经干细胞。
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