[发明专利]一种从冻存脐血中分离内皮祖细胞的方法在审
| 申请号： | 201710974356.9 | 申请日： | 2017-10-19 |
| 公开（公告）号： | CN107574143A | 公开（公告）日： | 2018-01-12 |
| 发明（设计）人： | 付亚茹;孙阳阳;曲廷瑜 | 申请（专利权）人： | 山东省齐鲁干细胞工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所37218 | 代理人： | 李桂存 |
| 地址： | 250102 山东省济南市*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开一种从冻存脐血中分离内皮祖细胞的方法，发现直接通过获得冻存脐血的总有核细胞数，并将其铺于人纤维黏连蛋白包被的培养皿中培养，即可获得内皮祖细胞；获得内皮祖细胞的方法高效、简便，无外源性培养物质便于细胞调整并可用于临床；可得到大量纯化的内皮祖细胞；使用本发明方法85%以上冻存脐血可以分离获得内皮祖细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 冻存脐血中 分离 内皮 细胞 方法 | ||
【主权项】：
一种从冻存脐血中分离内皮祖细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）自液氮罐中迅速取出30~50ml冻存脐血，37℃复苏，将融化后的脐带血，转入离心管中，添加100ml含0.5%人血清白蛋白的PBS缓冲液，充分混匀，室温下1500rpm/min离心10min，升速9，降速7，弃上清，获得总有核细胞沉淀；（2）将步骤（1）中沉淀用100ml含0.5%人血清白蛋白的PBS缓冲液重悬后，室温下1000rpm/min离心5min，升速9，降速9，弃上清，重复两次，获得总有核细胞沉淀；（3）将步骤（2）中的总有核细胞沉淀，用15ml EGM‑2& Single Quots培养液重悬，获得总有核细胞悬液，接种至预先包被人纤维黏连蛋白的培养皿中，用内皮祖培养液培养，获得内皮祖细胞。
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