[发明专利]一种基于高通量测序分析寡核苷酸序列杂质的方法及应用有效
| 申请号： | 201710840332.4 | 申请日： | 2017-09-18 |
| 公开（公告）号： | CN109517889B | 公开（公告）日： | 2022-04-05 |
| 发明（设计）人： | 张佩琢;郭良让;黄天富 | 申请（专利权）人： | 苏州吉赛基因测序科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869;C40B50/06 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 215123 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于高通量测序分析寡核苷酸序列杂质的方法及应用。本发明的方法包括如下步骤：构建用于寡核苷酸序列杂质分析的高通量测序文库；将所述高通量测序文库进行高通量测序，并根据测序结果对寡核苷酸序列组分进行分析；所述构建高通量测序文库中所使用的延伸引物序列依次由序列2第1‑22位所示的DNA分子和N个碱基A或碱基T或碱基C或碱基G组成；所述N为大于等于6的整数。通过实验证明：本发明的基于高通量测序分析寡核苷酸序列杂质的方法可以快速、准确和全面的对寡聚核苷酸序列中各组分纯度和含量进行分析。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 通量 分析 寡核苷酸 序列 杂质 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种用于寡核苷酸序列杂质分析的高通量测序文库的构建方法，包括如下步骤：1)将待检测寡核苷酸序列的3’端加poly尾，得到加poly尾产物；2)将所述加poly尾产物进行反向延伸并扩增，得到反向延伸并扩增产物；所述反向延伸并扩增所使用的引物由所述待检测寡核苷酸和延伸引物组成；所述延伸引物序列依次由序列2第1‑22位所示的DNA分子和N个碱基A或碱基T或碱基C或碱基G组成；所述N为大于等于6的整数；3)将所述反向延伸并扩增产物进行沉淀，得到沉淀后产物；4)将所述沉淀后产物依次进行末端修复、加A尾、连接头和PCR扩增，得到高通量测序文库。
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