[发明专利]一种口服载胰岛素纳米胶束的制备方法

摘要

本发明公开一种具有pH敏感性和膜粘附性的载胰岛素纳米胶束的制备方法，将胰岛素溶于稀酸溶液中形成胰岛素溶液，将聚（甲基丙烯酸甲酯‑co‑甲基丙烯酸）‑b‑聚甲基丙烯酸氨乙酯共聚物P(MMA‑co‑MAA)‑b‑PAEMA溶于有机溶剂中形成聚合物溶液，再将胰岛素溶液缓慢加入到聚合物溶液中，在pH=5.0~6.0的醋酸‑醋酸钠缓冲液中透析除去溶剂，离心、冷冻干燥，制得一种适合口服的粒径大小均一、载药量和包封率高、具有pH敏感性和膜粘附性的载胰岛素纳米胶束。

主权项

一种口服载胰岛素纳米胶束的制备方法，其特征在于：（1）所述的一种口服载胰岛素纳米胶束，是在弱酸性水溶液中自组装形成的一种壳‑核结构的纳米胶束，其中溶于酸性水溶液的胰岛素被包载在胶束核中，纳米胶束中所包载胰岛素质量占所投溶于酸性水溶液中胰岛素总质量的50%~80%，纳米胶束中所包载胰岛素质量占所得载胰岛素纳米胶束总质量的5~12%，所得载胰岛素纳米胶束粒径100~600nm，Zeta电位15~50mV；（2）所述的一种口服载胰岛素纳米胶束壳层是由疏水性pH敏感嵌段聚（甲基丙烯酸甲酯‑co‑甲基丙烯酸）[P(MMA‑co‑MAA)]和亲水性嵌段聚甲基丙烯酸氨乙基酯(PAEMA)共聚构成的聚（甲基丙烯酸甲酯‑co‑甲基丙烯酸）‑b‑聚甲基丙烯酸氨乙酯共聚物[P(MMA‑co‑MAA)‑b‑PAEMA]组成，其分子量为6000~15000，结构式如下：其中，x=20～40，y=20～50，z=20～50；（3）所述的一种口服载胰岛素纳米胶束同时具有pH敏感性和膜粘附性：A. 所述的pH敏感性是由构成壳‑核结构纳米胶束的壳内层的疏水性pH敏感嵌段聚（甲基丙烯酸甲酯‑co‑甲基丙烯酸）[P(MMA‑co‑MAA)]中的甲基丙烯酸发挥作用，甲基丙烯酸的pKa值为5.0~6.5，在人体胃酸pH=0.9~1.8的环境中，甲基丙烯酸的羧基去离子化，使得载胰岛素纳米胶束疏水性增强，核‑壳结构紧密，包裹在纳米胶束核内的胰岛素难以被释放，而在人体肠道pH=5.1~7.8环境中，甲基丙烯酸中的羧基质子化而使其溶解性增加，使得所述的载胰岛素纳米胶束核‑壳结构溶胀崩散，包裹在纳米胶束核内的胰岛素得以释放，所述的疏水性pH敏感嵌段聚（甲基丙烯酸甲酯‑co‑甲基丙烯酸）[P(MMA‑co‑MAA)]的结构式为：B. 所述的膜粘附性是由构成壳‑核结构纳米胶束的壳外层的亲水性嵌段聚甲基丙烯酸氨乙基酯（PAEMA）发挥作用，其所含氨基在人体肠道环境pH=5.1~7.8中易质子化带正电，与带负电的小肠上皮细胞发挥膜粘附作用，延长载药胶束在人体肠道中的停留时间并促进药物吸收，所述亲水性嵌段聚甲基丙烯酸氨乙基酯（PAEMA）结构式如下：（4）制备所述的一种口服载胰岛素纳米胶束的方法是：A. 将胰岛素、药用盐酸水溶液按照0.0003~0.0015:1的质量比在10~30℃混合搅拌，使胰岛素充分溶解，形成胰岛素酸液，所述药用盐酸水溶液的浓度为0.1~0.001mol/L，pH值为1.0~3.0；B. 搅拌下将胰岛素溶液缓慢加入到一种聚合物溶液中，在10~30℃搅拌0.15~6h形成混合溶液后，将所形成的混合溶液移入到透析袋中透析，并完成自组装过程；所述的一种聚合物溶液是将聚（甲基丙烯酸甲酯‑co‑甲基丙烯酸）‑b‑聚甲基丙烯酸氨乙酯共聚物P(MMA‑co‑MAA)‑b‑PAEMA、溶剂按照0.006~0.02:1的质量比，在10~30℃混合搅拌12h后形成，所述溶剂为丙酮、N，N‑二甲基甲酰胺（DMF)、二甲基亚砜（DMSO)中的至少一种；所述的透析是将混合溶液转移到截留分子量MWCO=7000D的透析袋中，在pH=5.0~6.0的醋酸‑醋酸钠缓冲液中透析12~48h，在该透析过程中，前12h每2h更换一次透析液，12h之后每6h更换一次透析液；所述的自组装是聚合物溶液中的疏水性pH敏感嵌段聚（甲基丙烯酸甲酯‑co‑甲基丙烯酸）[P(MMA‑co‑MAA)]形成口服载胰岛素纳米胶束的壳内层，并将药物胰岛素包载在内，而亲水性的聚甲基丙烯酸氨乙基酯(PAEMA)则形成胶束的壳外层；C. 透析结束后，以8000~15000r/min离心10~30min，水洗下层纳米乳液3次后，取纳米乳液‑40~‑50℃冷冻干燥12~24h，即制得所述的一种口服载胰岛素纳米胶束。